Концевая дезоксинуклеотидилтрансфераза

В 1962 г. Ф. Боллум обнаружил в тимусе теленка необычный фермент, названный конце­вой дезоксинуклеотидилтрансферазой, или тер­минальной трансферазой. Данный фермент ка­тализирует последовательное присоединение дезоксинуклеотидов к 3'-ОН-концу молекулы ДНК. Субстратом терминальной трансферазы при использовании в качестве кофактора ионов Mg24²⁺ является одноцепочечная ДНК с 3'-ОН-концом или двухцепочечная ДНК с выступаю­щим одноцепочечным 3'-ОН-концом. При ис­пользовании в качестве кофактора ионов Со²⁺ этот фермент может катализировать присоеди­нение дезоксинуклеотидов к 3'-ОН концу двух­цепочечной ДНК с тупыми концами или даже к 3'-ОН-концу двухцепочечной ДНК с высту­пающим одноцепочечным 5'-р-концом. При введении в реакцию, направляемую терминаль­ной трансферазой, лишь одного типа дезокси­нуклеотидов образуются молекулы ДНК, имею­щие гомополимерные одноцепочечные 3'-кон­цы. Таким же образом можно достроить другим молекулам ДНК гомополимерные 3'-концы, комплементарные первым. Смешение получен­ных препаратов ДНК при определенных усло­виях может приводить к формированию гиб­ридных молекул ДНК. Именно с помощью кон­цевой дезоксинуклеотидилтрансферазы в 1972 г. был выполнен первый эксперимент по реком­бинации молекул ДНК in vitro.