Влияние агонистов ОР на поведенческие проявления тревожности животных.
В качестве препаратов, воздействующих на опиоидную систему, в данном исследовании были использованы два пептидных соединения, созданных в нашей стране. Синтетический аналог лей-энкефалина, даларгин (Tyr-D-Ala-Gly-Phe-Leu-Arg), разработанный в Кардиологическом научном центре РАМН (Титов и соавт., 1985), является агонистом ОР преимущественно δ-типа. Селанк (Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro), синтезированный в ИМГ РАН (Пономарёва-Степная и соавт., 1984), – новый препарат с анксиолитическими свойствами, изученными в Институте фармакологии РАМН (Середенин и соавт., 1996).
Установлена способность даларгина при внутрибрюшинном (20 мкг/кг) введении снижать поведенческие проявления тревожности животных в тестах Вогеля, «челночная камера» и «приподнятый крестообразный лабиринт» (ПКЛ). В процессе статистической обработки результатов обнаружилось, что выраженность анксиолитического эффекта даларгина зависит от исходного поведенческого статуса животных, в частности, от их ГДА в ATS. Так, в конфликтном тесте Вогеля этот эффект наиболее выражен у крыс с низкой двигательной активностью (НА) в ATS. Курсовое введение даларгина оказывает анксиолитическое действие, выражающееся в переходе от активной стратегии избегания в «челночной камере» к пассивной, только у крыс с высокой исходной двигательной активностью (ВА) в ATS. Анксиолитическое действие даларгина в тесте ПКЛ наблюдалось лишь на фоне дополнительных стрессорных воздействий, сопровождавшихся повышением тревожности крыс, блокировалось налоксоном и было более выражено у ВА животных (табл. 1).
|
|
Таблица 1. Влияние курсового периферического (внутрибрюшинного) введения даларгина на поведение белых беспородных крыс-самцов в ПКЛ на фоне стресса питьевой депривации
воздействие | Общая выборка | Высокоактивные | Низкоактивные |
Интактные животные | 77±14 (а) 2.8±0.7 (б) (n=19) | 90±20 3.5+0.7 (n=11) | 58±18 1.9±0.6 (n=8) |
Физ. р-р + стресс | 17±5 *** 0.8±0.2 *** (n=22) | 11±5 ** 0.4±0.2 *** (n=10) | 21±7 * 1.1±0.3 (n=12) |
Даларгин (20 мкг/кг) | 48±12 # 1.8±0.4 # (n=23) | 76±20 ## 3.0±0.7## (n=11) | 22±8 @ 0.8±0.3 @@ (n=12) |
Даларгин + Налоксон (10 мг/кг) | 20±6 + 0.6±0.2 + (n=24) | 15±9 ++ 0.5+0.2 +++ (n=12) | 25±9 0.8+0.4 (n=12) |
(а) – время нахождения, (б) – количество выходов крыс в «открытый рукав» ПКЛ,
* – p<0.05, ** – p<0.01, *** – p<0.001 – достоверность отличия от интактных крыс;
# – p<0.05, ## – p<0.01, ### – p<0.001 – эффект даларгина;
@ – p<0.05, @@ – p<0.01 – отличие регистрируемых параметров у животных с высокой и низкой локомоторной активностью;
+ – p<0.05, ++ – p<0.01, +++ – p<0.001 – снятие налоксоном эффекта даларгина.
Приведены средние значения ± ошибка среднего.
|
|
В аналогичных тестах не было обнаружено анксиолитического действия селективного агониста ОР μ-типа ДАГО (Tyr-D-Ala-Gly-N-methyl-Phe-Gly-ol), то есть снижение тревожности животных под действием опиоидов, в первую очередь, опосредовано δ-ОР. Подтверждение этому было получено с использованием селективных антагонистов ОР δ1‑типа – 7‑бензлиденналтрексон (BNTX) и δ2‑типа – налтрибен (NTB). При центральном введении даларгин оказывал анксиолитическое действие в дозах, в 1000 раз более низких, чем при внутрибрюшинном введении. Эффект также был более выражен у ВА крыс и блокировался селективными антагонистами δ-ОР. Причем BNTX блокировал анксиолитический эффект даларгина на ВА, но не на НА крыс (табл. 2).
Таким образом, даларгин как при внутрибрюшинном, так и при центральном введении оказывает блокируемое антагонистами ОР анксиолитическое действие на белых беспородных крыс в условиях стресса. Степень проявления и механизм этого действия зависит от исходной двигательной активности животных: более выраженный эффект пептида на крыс с высокой двигательной активностью опосредован ОР δ1 и δ2 типов. Анксиолитическое действие даларгина на НА животных наблюдается лишь при центральном введении и блокируется только высокими дозами антагониста δ2‑ОР.
Таблица 2. Влияние антагонистов δ1 (BNTX) и δ2 (NTB) ОР на анксиолитический эффект даларгина при центральном (внутрижелудочковом) введении
воздействие | Общая выборка | Высокоактивные | Низкоактивные |
Интактные животные | 38±9 (а) ** 2.4±0.5 (б) ** (n=14) | 46±9 * 3.4+0.7 * (n=7) | 30±16 * 1.3±0.3 (n=7) |
Физ. р-р | 6±3 0.4±0.1 (n=23) | 9±6 0.4±0.3 (n=11) | 2±1.2 0.2±0.1 (n=12) |
Даларгин (0.05 мкг/кг) | 42±6 ** 1.4±0.3 ** (n=44) | 64±10 * 2,2±0.4 * (n=19) | 26±7 * @ 1,0±0.3 (n=25) |
Даларгин (0.05 мкг/кг) + BNTX (10 мкг/кг) | 14±5 # 0.8±0.2 (n=20) | 10±4## 0.6+0.2# (n=8) | 17±7 0.9+0.3 (n=12) |
Даларгин (0.05 мкг/кг) + NTB (10 мкг/кг) | 7±2 ### 0.7±0.2 # (n=20) | 8±3 ## 0.8±0.3 # (n=9) | 6±3 # 0.6±0.3 (n=11) |
(а) – время нахождения, (б) – количество выходов крыс в «открытый рукав» ПКЛ,
* – p<0.05, ** – p<0.01, *** – p<0.001 – отличия от крыс, получавших физ. раствор;
# – p<0.05, ## – p<0.01, ### – p<0.001 – снятие эффекта даларгина антагонистами;
@ – p<0.05 – отличие регистрируемых параметров у ВА и НА животных
Приведены средние значения ± ошибка среднего.