Цели лабораторного занятия:
1. Закрепить теоретические знания и практические навыки по хроматографии в тонком слое сорбента.
2. Выбрать оптимальную систему для исследования лекарственного препарата с помощью стандартного образца веществ-сведетелей (СОВС).
3. Используя ТСХ, установить подлинность и чистоту лекарственных веществ.
1. Подбор системы для оптимального хроматографирования.
На линию старта пластинок «Silufol» размером 1,5х7 см наносят спиртовой раствор СОВС новокаина гидрохлорида. Пластинки помещают в камеры с системами растворителей:
1) хлороформ
2) хлороформ – этанол 9:1
3) хлороформ – этанол 7:3
4) хлороформ – этанол 1:1
5) хлороформ – этанол 3:7
6) этанол
Объем системы растворителей 2 мл. Когда фронт растворителя дойдет до линии финиша, вынимают хроматограмму, высушивают и проявляют в йодной камере. Рассчитывают значения Rf. Оптимальной системой растворителей является система, дающяя значение Rf близкое к 0,5.
- Определение подлинности и чистоты новокаина гидрохлорида.
На линию старта пластинки «Silufol» размером 3х7 см наносят спиртовые растворы СОВС новокаина гидрохлорида и задачи. Пластинку помещают в камеру с выбранной системой растворителей. Когда фронт растворителя дойдет до линии финиша, вынимают хроматограмму, высушивают и проявляют в йодной камере. Рассчитывают значения Rf. Делают вывод о соответствии новокаина гидрохлорида стандартному образцу (если разница между значениями Rf отличается не более чем на 0,02, препарат соответствует стандарту).
|
|
Вопросы для самоподготовки:
1. В чем сущность хроматографического процесса?
2. Как классифицируют методы хроматографии?
3. Каким образом проводится детектирование веществ на хроматограмме?
4. Что такое: а) высота хроматографического пика; б) ширина хроматографического пика; в) общий удерживаемый объем; г) приведенный удерживаемый объем?
5. Достоинства и недостатки газовой адсорбционной и газожидкостной хроматографии.
6. Назовите особенности капиллярной хроматографии.
7. На чем основан качественный хроматографический анализ?
8. Какие комбинированные хроматографические методы вы знаете? Преимущества этих методов.
9. В чем сущность основных методов количественной хроматографии: а) метода нормировки; б) нормировки с калибровочными коэффициентами; в) абсолютной калибровки; г) внутреннего стандарта?
10. Как влияет температура на хроматографический процесс?
11. Какое практическое значение имеет газовая хроматография?
12. Какие особенности имеет жидкостная абсорбционная хроматография?
13. В чем сущность хроматографии в тонком слое сорбента? Как проводится качественный и количественный анализ методом ТСХ?
14. Особенности бумажной хроматографии.