Пептиды и белки

Пептиды-продукты взаим-ия АМК. Образуются либо при гидролизе белков, либо много пептидов, облад-их биол.активностью. N-концевая АМК амидная связь.

O H O O H O

H₂N-CH-C + H-N-CH-C H₂N-CH-C-N-CH-CH-C

CH₃ OH CH₂OH OH -H₂O CH₃ CH₃OH OH С-кольц.АМК

Аланин сирин аланилсерин

N-концевая (не участв.в об-ие пептид.связи)

COOH-не уч-ет в об-ие пептид.связи.

Строение пептидной группы

R₂H

Cl N

C C₂

O R₂ H пептидная связь яв-ся плоской копланарной

Неопределенная пара е^-атома N нах-ся в сопряжении с П-связью карбонильной группы в р-те чего связь с-N укорачивается и имеет характер двойной связи, вокруг α-ой нет свободного вращения.

П,р-сопряж.

O O O^-

-C-N- -C=N- C=N⁺-

H H H Благодаря наличию электронного резонанса возможно об-ие водор.связей, и возможно сущ-ие цис и транс изомеров. В природных пептидах и белках встречается транс расп-ие радикалов.

Химический метод синтеза пептидов(классич)

При обычном смещении 2-х АМК возможны след.затруднения:

1. Из-за диполярной структуры проведение реак.требует высоких температур, что приводит к побочным продуктам(дикетопиперацин)

2. АМК необходимо соед-ть в строгой опред-ой последовательности

Классич.метод всключает несколько стадий:

1. Защита аминогруппы N-канцевой АМК чаще используют реак.ацилирования след.реагентами:

O O

С₆H₅CH₂O-C бензоксикарбонихлорид;(CH₃)₃COC

Cl N₃

Третбутоксикарбоксазид O O

H₂N-CH-COOH+C₆H₅CH₂O-C C₆H₅CH₂OC-NH-CH-COOH

CH₃ Cl -HCl CH₃O

2. Активация карбоксильной группы, N-защищенной АМК. Для актив.исп-ют либо PCl₅, либо SOCl₂, C₂H₅O-C

ЭтилхлорформиатCl

O O O

C₆H₅CH₂OC–NH–CH–COOH+SOCl₂®C₆H₅CH₂OC–NH–CH–C + SO₂ +HCl

CH₃ CH₃

3. Защита карб-ой гр, С-канцевой АМК.

H₂N-CH-COOH + C₂H₅OH F H₂N-CH-COOC₂H₅+H₂O

CH₂OH CH₂OH

4.Синтез

O O O CH₃ O H

C₆H₅CH₂OC–NH–CH–C + HNH–CH–COOC₂H₅®C₆H₅CH₂OC–NH–CH–C–N–CH–COOC₂H₅

CH₃ Cl CH₂OH

5-6. Снятие защиты с N и С концов.

O O O

С₆H₅-CH₂O-C-NH-CH-C-N-CH-C

CH₃ CH₂OH OC₂H₅

H₂ P H₂O,OH^-

C₆H₅CH₃ -C₂H₅OH

O H

H₂N-CH-C-N-CH-COOH

CH₃ CH₂OH

Твердофазный синтез пептидов (ТФСП)

Полипептидная цепь наращивается на тв.основе без выделения промеж.продуктов.

смола –СH₂Cl + HOOCCH-NH₂® смола CH₂OC-CH-NH₂

R -HCl R

На конце свободная аминогруппа ацилир-ся след.АМК, у α-ой защищена аминогр.(бок-группы) в присутствии активатора карбоксильной группы N-N^’, где карбоксил N-N- дициклогексилкарбодисемид.