Интенсивность роста микобактерий

Культуральный метод

Метод посева, или культуральный метод, отличается большей чувствительностью, чем микроскопия мазков, и имеет перед последним ряд преимуществ. Он позволяет обнаруживать несколько десятков жизнеспособных микобактерий в исследуемом материале и имеет большую диагностическую ценность. Это особенно важно при исследовании материала от впервые выявленных или леченных больных, выделяющих небольшое количество микобактерий. По сравнению с микроскопией, культуральное исследование позволяет увеличить число выявленных больных туберкулёзом более чем на 15-25%, а также верифицировать туберкулёз в более ранних стадиях, когда заболевание ещё хорошо поддаётся лечению. Очень важным преимуществом культурального исследования считают возможность получения культуры возбудителя, которая может быть идентифицирована и изучена в отношении лекарственной чувствительности, вирулентности и других биологических свойств. К недостаткам методов культивирования следует отнести их длительность (срок ожидания материалов достигает 10 недель), более высокую стоимость, сложность обработки диагностического материала. Для достоверной клинической интерпретации результатов микробиологического исследования необходимо соблюдать следующее правило: микроскопическое и культуральное исследования нужно производить параллельно из одной и той же пробы диагностического материала.

Питательные среды, используемые для получения культур микобактерий можно разделить на 3 группы:

· яичные (Левенштейна-Йенсена, Финна, Петраньяни);

· агаровые (Миддлбрука 7Н10, 7Н11);

· бульонные или жидкие (Миддлбрука 7Н9, 7Н12, Дюбо);

Повсеместно самым популярным методом выявления

возбудителя туберкулёза до настоящего времени считается

получение культуры М. tuberculosis (МБТ) на плотных

средах. В практических лабораториях нашей страны чаще

всего используют среды Левенштейна-Йенсена (ЛЙ) и Финн-2.

При этом культуральное исследование диагностического

материала занимает не менее 3-8 недель – именно в эти

сроки появляется рост МБТ на плотной среде, а отрицатель-

ным результатом считается отсутствие роста в течение 12

недель после поступления образца в лабораторию.

· (+) – 1-20 КОЕ в пробирке (скудное бактериовыделение);

· (++) – 20-100 КОЕ в пробирке (умеренное бактериовыделение);

· (+++) -> 100 КОЕ в пробирке (обильное бактериовыделение)

Агаровые среды Middlebrook 7Н10 и 7Н11 являются прозрачными и позволяют увидеть колонии на 10-12 день после посева. В то время как на непрозрачных средах, таких как ЛЙ, визуализированный рост появляется значительно позже. Прозрачность среды даёт возможность изучать микроколонии в чашках на ранних сроках при помощи диссекционного микроскопа.