Для определения групп крови применяются стандартные эритроциты с известными агглютиногенами А и В и плазма крови реципиента, в которой определяется наличие агглютининов"a" и "b".
Техника получения стандартных эритроцитов: У доноров забирается кровь трех групп — 0I, АII, ВIII. Забранную кровь отмывают. Вначале кровь центрифугируют для разделения на фракции — плазму и эритроциты. Плазму удаляют, а к эритроцитам добавляют физиологический раствор поваренной соли и смешивают. Затем кровь вновь центрифугируют и удаляют жидкую часть. К оставшимся эритроцитам повторно добавляют физиологический раствор. Отмывание эритроцитов производят трижды. После окончания приготовления стандартных эритроцитов к ним добавляют консервант и хранят в холодильнике при температуре от +6° до +8 °С в течение 2 месяцев, титр их не должен быть ниже 1:32.
Методика определения групп крови по стандартным эритроцитам:
-На белую планшетку со смачиваемой поверхностью наносятся цифровые изображения групп крови и серологическая формула стандартных эритроцитов рядом с каждой из трех клеток.
- В каждую клетку соответственно подписям слева направо наносятся испытуемая плазма реципиента в количестве 2 капель (0,1 мл)
- Рядом добавляется маленькая капля (0,01 мл) стандартных эритроцитов в соотношении 1 к 10.
- Капли тщательно перемешивают палочками (каждую каплю - отдельной палочкой, углом предметного стекла)и дается экспозиция в течение 3—5 минут
Реакция исследуемой сыворотки(плазмы) со стандартными эритроцитами групп | Группа крови | |
A(II) | B(III). | |
+ | + | О αβ(I) |
- | + | А β(II) |
+ | - | В α(III) |
- | - | АВ(IV) |
1. Положительная реакция агглютинации (+)со стандартными эритроцитами групп A(II) и В(III). Следовательно, исследуемая сыворотка (плазма) содержит агглютинины "a" и "b" и кровь принадлежит к группе 0(I).
2. Положительная реакция агглютинации (+)со со стандартными эритроцитами группы B(III) Следовательно, исследуемая сыворотка (плазма) содержит агглютинин "b"и кровь принадлежит к группе A(II)
3.Положительная реакция агглютинации (+)со стандартными эритроцитами групп A(II).Следовательно, исследуемая сыворотка (плазма) содержит агглютинины "a" и кровь принадлежит к группе B(III).
4. Отрицательная реакция агглютинации (-)со стандартными эритроцитами групп A(II) и В(III). Следовательно, в исследуемой сыворотке (плазме) отсутствуют агглютинины "a" и "b" и кровь принадлежит к группе AB(IV).
Ошибки при определении группы крови: