Для изучения аминокислотного состава белков можно использовать специфические качественные реакции, основанные на особенностях строения бокового радикала аминокислот. Проделайте качественные реакции, указанные в таблице, с растворами яичного, соевого белков и с желатином, получаемым путем экстракции растворимых фракций белка соединительной ткани – коллагена. На основании полученных результатов сделайте выводы об особенностях аминокислотного состава указанных белков. Обратите внимание, что определяемые аминокислоты являются незаменимыми и обуславливают пищевую ценность белка. Исключение - тирозин, который является заменимой аминокислотой только при наличии достаточных количеств фенилаланина (синтезируется in vivo путем гидроксилирования фенилаланина).
Качественная реакция | Идентифицируемая кислота | Принцип | Методика | Результат | ||
яичный белок | соевый белок | желатин | ||||
Ксантопротеиновая (реакция Мульдера) | фенилаланин, тирозин, триптофан | Нитрование бензольного кольца | К 5 кап. р-ра белка добавить 3 кап. концентр. HNO3. Нагреть до кипения (осторожно!) до появления желтой окраски. После охлаждения добавить по кап. 10%NaOH до перехода окраски в оранжевую. | |||
Реакция Миллона | Фенольная группа тирозина | образование ртутной соли нитротирозина | К 5 кап. р-ра белка добавить 3 кап. раствора Милона (азотнокислые соли окиси и закиси ртути в HNO3). Осторожно нагреть не доводя до кипения до появления пурпурно-красной окраски. | |||
Реакция Фоля | SH-группа цистеина | В результате щелочного гидролиза цистеина образуется Na2S, образующий при взаимодествии с ацетатом свинца черный осадок PbS | В пробирку налить 10 кап. ацетата свинца и добавить по каплям р-р NaOH до растворения образующегося в начале гидрата окиси свинца. К раствору добавить 5 кап. р-ра белка и прокипятить до выпадения черного осадка. | |||
Реакция Адамкевича | триптофан | конденсация триптофанав кисл. среде с глиоксиловой кислотой с образованием продуктов конденсации красно-фиолетового цвета | К 5 кап. р-ра белка добавить 5 кап. конц. CH3COOH (источник глиоксиловой кислоты), слегка нагреть (!), затем охладить (!) и осторожно (!) по стенке наслоить 10 кап. конц. H2SO4. На границе 2-х слоев появляется красно-фиолетовое кольцо. |
На основании полученных результатов сделайте вывод.
|
|