Прежде чем приступить к работе по определению группы крови, необходимо ознакомиться с этикетками стандартных сывороток всех четырех групп. Затем провести макроскопическую оценку пригодности сывороток. На этикетках имеются следующие сведения:
• учреждение, в котором изготовлена сыворотка;
• групповая принадлежность сыворотки с обязательным указанием агглютининов,
• номер серии,
• титр агглютининов, он должен быть не менее 1:32,
• срок годности сыворотки (число, месяц, год),
• наличие цветных полос: у группы 0(I) - полос нет, у группы А(II) - две синие, у группы B(III) - три красные, у группы АВ(IV) - четыре желтые.
Стандартные сыворотки выпускаются с определенной цветной маркировкой: I(0) - бесцветная, II(А) - голубая, III(B) - красная, IV (АВ) - желтая. Использование красок не влияет на свойства сывороток (титр и срок годности).
Макроскопически сыворотки должны быть прозрачными, допускается небольшая опалесценция. При наличии помутнения или хлопьев сыворотка считается не пригодной к определению группы крови. Срок годности стандартной сыворотки равняется шести месяцам с момента ее расфасовки. По истечении шести месяцев ее можно проверить и, если она не утратила своих свойств, то на СПК срок годности продляется еще на два месяца.
|
|
Определение группы крови проводят на специальных эмалированных металлических пластинках со смачиваемой поверхностью, на которых вверху обозначены группы крови, а под ними размещены два ряда лунок для капель сывороток и крови. Слева имеется разметка серий сывороток. При отсутствии специальных пластин определение группы крови можно осуществлять на обычных фарфоровых тарелочках, на которых делается аналогичная разметка. На пластинках сверху необходимо написать фамилию и инициалы больного, у которого определяется группа крови.
На сухую пластинку, под соответствующие обозначения групп крови, наносят в лунки по одной большой капле (0,1 мл) стандартной сыворотки (титр 1:32) двух серий; капли второй серии сывороток располагают во второй ряд. Всего получается шесть капель. Сыворотку берут из каждой ампулы своей пипеткой и опускают ее в ту же ампулу с сывороткой. Исследуемую кровь, взятую из пальца или пробирки, размещают в виде крупной капли на пластинке справа. Из нее забирают каплю крови величиной в 10 раз меньшую (0,01 мл), чем капля сыворотки. Обычно это делают стеклянной палочкой, погружая ее в каплю исследуемой крови, а затем размещают эту маленькую каплю рядом с каплей стандартной сыворотки. Перемешивание капель крови с сывороткой производят отдельными для каждой капли стеклянными палочками. Можно перемешивать капли одной палочкой, но в этом случае необходимо, после перемешивания каждой капли, промывать палочку в стакане с изотоническим раствором хлористого натрия и насухо вытирать.
|
|
После размешивания капель пластинку слегка покачивают, затем оставляют в покое на одну - две минуты, потом снова покачивают. Через пять минут к капле смеси сывороток и эритроцитов, в которых произошла агглютинация, добавляется по одной капле изотонического раствора хлористого натрия для устранения псевдоагглютинации, после чего можно делать заключение о группе крови.
Если агглютинация произошла, то в каплях смеси сывороток и крови видны невооруженным глазом мелкие красные комочки (агглютинаты), состоящие из склеенных эритроцитов. Иногда эти комочки сливаются в более крупные и выглядят в виде хлопьев неправильной формы, а сыворотка становится обесцвеченной.
Если в каплях агглютинация не произошла, то смесь сыворотки и крови остается равномерно окрашенной в красный цвет и в ней не обнаруживаются агглютинатов. С помощью стандартных сывороток мы устанавливаем наличие или отсутствие в исследуемой крови агглютиногенов А и В. В результате такого исследования возможны четыре различных комбинации положительных и отрицательных реакций (таблица 3):
1. Если сыворотки всех трех групп дали отрицательную реакцию, то исследуемая кровь принадлежит к первой группе.
2. Наличие агглютинации с сыворотками первой и третьей групп свидетельствует о принадлежности исследуемой крови ко второй группе.
3. Проявление реакции агглютинации с сыворотками первой и второй групп свидетельствует о принадлежности крови к третьей группе.
4. Если сыворотки всех трех групп крови дали реакцию агглютинации (и она является специфической), то исследуемая кровь принадлежит к четвертой группе. В последнем случае, для исключения неспецифической агглютинации исследуемых эритроцитов, необходимо провести контрольное исследование со стандартной сывороткой четвертой группы, и только при получении отрицательного результата, можно утверждать, что исследуемая кровь принадлежит к четвертой группе.
Таблица 3. Определение группы крови при помощи стандартных сывороток
|
Примечание: Знаком (+) обозначена агглютинация, знаком (-) – ее отсутствие.
Результат определения группы крови записывается в правом верхнем углу лицевой страницы истории болезни с указанием даты и подписи врача, производившего определение, или на этой же странице заполняется соответствующая строка.