Исследование штаммов-продуцентов

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ПОСТАНОВКЕ ИССЛЕДОВАНИЙ ПО ГИГИЕНИЧЕСКОМУ НОРМИРОВАНИЮ МИКРОБНЫХ ПРЕПАРАТОВ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ

Методические указания разработаны отделом гигиены и профессиональных заболеваний ЦНИЛа Рижского медицинского института.

 

Для накопления опыта и получения сопоставимых результатов воздействия микробных препаратов на организм человека и животных, могущих в дальнейшем быть использованными при разработке критериев оценки токсичности и опасности этих препаратов, требуется проведение единых исследований.

 

В настоящих Методических указаниях приведена схема постановки исследований по гигиеническому нормированию микробных препаратов и даны рекомендации по обоснованию их предельно допустимых концентраций в воздухе рабочей зоны.

 

Методические указания предназначены для использования в работе научно-исследовательских организаций гигиенического профиля и учреждений санитарно-эпидемиологической службы, занимающихся исследованием, обоснованием и подготовкой гигиенических нормативов различных веществ в объектах внешней среды.

 

Токсикологическая оценка микробных препаратов связана с их гигиеническим нормированием в воздухе рабочей зоны производственных помещений.

 

В настоящее время возрастает число микробных препаратов, увеличивается производство и масштабы их применения, что может представлять потенциальную опасность неблагоприятного воздействия на организм людей, занятых как производством указанных препаратов, так и их применением.

 

Для борьбы с бактериальными, грибными и вирусными заболеваниями растений, которые наносят большой урон сельскохозяйственному производству, наряду с химическими веществами, нередко высокоопасными, широко используются микробные препараты. Применение последних в этой области очень перспективно, т.к. они обладают относительно слабой токсичностью в отношении человека и животных и специфическим действием на возбудителей ряда болезней растений. Вещества, получаемые при помощи микробиологического синтеза, широко применяются и в других отраслях народного хозяйства.

 

 ОБЩИЕ УКАЗАНИЯ ПО ГИГИЕНИЧЕСКОМУ НОРМИРОВАНИЮ МИКРОБНЫХ ПРЕПАРАТОВ

При производстве микробных препаратов работающие имеют контакт главным образом с культурой и готовым продуктом. Токсикологическая оценка последнего проводится, в основном, согласно "Методическим указаниям к проведению экспериментальных исследований для обоснования ПДК вредных веществ в воздухе производственных помещений" (1969). При санитарном нормировании указанных препаратов нельзя оперировать такими понятиями, как эмпирическая или структурная формула вещества, молекулярный вес, точки плавления и кипения и др., а также невозможно их определение в воздухе химическим способам.

 

Для обоснования ПДК микробных препаратов необходимо оценить возможные проявления и выраженность специфического биологического действия исследуемых веществ, связанных с размножением микроорганизмов и включением их в аутофлору организма, вариабельность их свойств в зависимости от климатических условий и состава питательных сред. Комплекс белков бактериальной клетки при попадании в организм может вызвать его сенсибилизацию, поэтому в качестве специфических тестов рекомендуется использовать микробиологические и иммунологические показатели.

 

 ОСНОВНАЯ СХЕМА ПОСТАНОВКИ ЭКСПЕРИМЕНТА

 

Исследование штаммов-продуцентов

Для решения вопроса о возможности использования штамма микроорганизма в качестве продуцента следует определить его патогенность и вероятность носительства.

 

Степень патогенности определяется вирулентностью и выражается количеством микробных тел, вызывающих летальный эффект.

 

Ориентировочно патогенным следует считать такой штамм микроорганизма, который при внутрибрюшинном введении вызывает гибель 50% подопытных животных (крысы, мыши) в дозе не более 10  микробных тел на одно животное*.

_______________

* Указанные величины в качестве критерия вирулентности обоснованы Е.А.Мельниковой (ВНИИГИНТОКС).

 

Если гибели животных не наблюдается, то для достоверности оценки степени патогенности штаммов следует проводить определение вирулентности и на группе ослабленных животных с использованием некоторых функциональных и экспериментальных нагрузок: химических (спирт, гексенал и др.), физических (холодовая, повышенная температура), механических (плаванье и др.) и биологических (голод и др.).

 

Патогенные штаммы не допускаются к использованию в технологическом процессе.

 

Штаммы-продуценты, обладающие допустимой вирулентностью, подлежат дальнейшему исследованию на возможность носительства (одноразовое внутрибрюшинное и внутрижелудочное введение культуры продуцента соответственно в дозах 10  и 10  микробных тел на одно животное).

 

Носительство определяется путем посева (в течение 30 дней с интервалом в 2-3 дня) со строгим соблюдением общепринятых правил стерильности из следующих биосубстратов: кожных покровов, слизистых оболочек полости рта и носа, крови, печени, почек, селезенки.

 

Прекращать посевы следует после 3-кратного отрицательного результата в указанный период наблюдений.

 

В случае высевания продуцента в срок более 30 дней исследуемый штамм также не рекомендуется для использования в производстве.

 

 2. Исследование готового сухого микробного препарата

С целью обоснования его ПДК в воздухе рабочей зоны готовый микробный препарат подлежит экспериментальному токсикологическому изучению с возможным прогнозированием отдаленных последствий. Необходимо произвести гигиеническую оценку условий труда, обследование состояния здоровья работающих, а также разработать методику определения содержания препарата в воздухе.

 

Для этого необходимо провести:

 

2.1. 4-х месячную ингаляционную затравку белых крыс для оценки препарата на:

 

а) токсичность - согласно "Методическим указаниям к проведению экспериментальных исследований для обоснования ПДК вредных веществ в воздухе производственных помещений" (1969) с использованием специфических микробиологических и иммунологических тестов, определяющих порог хронического действия;

 

б) аллергенность - согласно методическим указаниям "Постановка исследований по выявлению сенсибилизирующих свойств и установлению порогов аллергенного действия промышленных веществ", одобренным Союзной проблемной комиссией "Научные основы гигиены труда и профпатологии" (1975).

 

На основании экспериментальных данных* обосновываются предельно допустимые концентрации, которые выражаются в единицах микробных тел/м . Одновременно дается перерасчет в мг/м .

_______________

* Если наполнитель потенциально опасен за счет фиброгенного действия, нормирование проводится согласно "Временным методическим указаниям к обоснованию ПДК аэрозолей фиброгенного действия" (1965).

 

Учитывая, что при обосновании величины коэффициента запаса веществ, обладающих аллергенным действием, и антибиотиков указанная величина равняется 10, целесообразно и при нормировании микробных препаратов принять аналогичный коэффициент запаса.

 

2.2. Гигиеническое изучение условий труда и состояния здоровья рабочих производства микробных препаратов. При этом следует обратить особое внимание на:

 

а) технологический процесс и продолжительность воздействия пыли (кратковременное, прерывистое, длительное, непрерывное);

 

б) агрегатное состояние препарата;

 

в) активность и длительность его хранения;

 

г) количество микробных тел в 1 г препарата;

 

д) необходимый наполнитель;

 

е) содержание пыли, в т.ч. микробных тел (минимальные и средние данные) на рабочих местах с учетом технологического процесса и времени года (в каждой точке отбирается не менее 8-10 проб).

 

Электронный текст документа

подготовлен АО "Кодекс" и сверен по:

рассылка

Методические указания к постановке исследований по гигиеническому нормированию микробных препаратов в воздухе рабочей зоны (Источник: ИСС "ТЕХЭКСПЕРТ")