2015-05-10
5809
Метод основан на выращивании (эксплантации) изолированных клеток, кусочков тканей, органов вне организма (in vitro).
Различают клеточное, тканевое и органное культивирование. При клеточном и тканевом культивировании отдельные клетки или кусочки ткани выращивают погруженными в питательную среду.
Такой способ позволяет сохранить морфологическую структуру культивируемых клеток, тканей.
Культуры клеток дают возможность получить однородный клеточный материал в больших количествах. На клеточных культурах можно изучать физические и химические воздействия.
Наиболее удобным объектом для медицинских генетиков оказалась культура лимфоцитов периферической крови (рис. 1.36).
Для ее получения достаточно взять 1-2 мл венозной крови и добавить ее в смесь питательной среды с фитогемагглютинином (белок бобовых растений). Он вызывает деление лимфоцитов.
Продолжительность культивирования составляет 48-72 ч.
Вторым методическим условием цитогенетических исследований является использование колхицина, разрушающего веретено деления и останавливающего клеточное деление на стадии метафазы.Его добавляют в культуры клеток за 2-3 ч до окончания культивирования.
После этого клетки окрашивают и помещают под микроскоп (рис. 1.36).
Рис. 1.36. Приготовление цитогенетических препаратов путем культивирования лимфоцитов периферической крови
