КОМПЛЕКСОНОМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАЛЬЦИЯ В КРОВИ
Реактивы. 1. 0,005 М р-ор трилона Б: 1,861 г сухого вещества, доведенного дистиллированной водой до 1 л.
2. 10 % р-ор NaОН.
3. 1 % р-ор мурексида.
4. Дистиллированная вода.
Оборудование: пипетка для раствора NаОН, капельница для мурексида, пипетка на 1 мл для трилона Б, цилиндр для воды на 25 мл, колбы конические на 50 мл.
Принцип метода. Метод основан на способности кальция с мурексидом (пурпурат аммония) давать комплексное соединение розового цвета. Под действием более сильного комплексообразователя трилона Б (ЭДТА или динатриевая соль этиленди-аминтетраацетата) мурексидкальциевый комплекс разрушается и образуется новый трилонкальциевый комплекс. При этом освобождается эквивалентное количество мурексида, который окрашивает раствор в сине-фиолетовый цвет.
Ход анализа. В две колбочки, контрольную (К) и опытную (О) при помощи цилиндра наливают по 25 мл дистиллированной воды, по 1 мл 10 % р-ра NаОН
и по 10 кап. 1 % р-ра мурексида. Затем в опытную колбочку добавляют 1 мл сыворотки крови. При этом сине-фиолетовая окраска в этой колбочке меняется на розовую. Титруют 0,005 М р-ром трилона Б до появления такой же окраски, как в контроле.
|
|
Протокол работы.
1. На титрование опытного образца израсходовано…мл 0,005 М р-ра трилона Б.
2. Содержание кальция (мг %) в сыворотке крови рассчитывают по формуле:
Х = n · 0,2 ·100, где
Х – концентрация кальция в сыворотке крови, мг %;
n – количество мл 0,005 М р-ра трилона Б, израсходованного на титрование опытного образца
0,2 – количество мг кальция, которое соответствует 1 мл 0,005 М р-ра трилона Б.
100 – коэффициент пересчета кальция на 100 мл сыворотки крови.
Примечание. Для пересчета мг % на ммоль/л, результат умножить на 0,25,
т.е. 10: 40 = 0,25.
Вывод: биохимическим анализом установлено, что содержание кальция в сыворотке крови составляет…..ммоль/л.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №2