Мочевая кислота (2,6,8-триоксипурин) является конечным продуктом обмена пуриновых оснований, входящих в состав сложных белков — нуклеопротеинов. Образующийся в процессе дезаминирования аденозина гипоксантин превращается в ксантин, который далее окисляется с участием ксантиноксидазы в мочевую кислоту.
При отсутствии пуринов в пище образование и экскреция мочевой кислоты у человека идут примерно с равными скоростями.
К продуктам, содержащим мало пуриновых оснований, относятся молоко, сыр, яйца; продукты же, богатые нуклеиновыми кислотами (печень, зобная железа и др.), содержат большие количества пуринов.
Качественной реакцией на мочевую кислоту служит мурексидная проба, основанная на образовании мурексида — аммонийной соли пурпуровой кислоты красного цвета.
Среди известных методов количественного определения концентрации мочевой кислоты различают:
- химические - с колориметрическим завершением, основанные на способности мочевой кислоты давать окрашенные соединения за счет восстановления фосфорновольфрамовой, мышьяково-молибденовой кислоты, железосинеродистого калия и некоторых других веществ; участвовать в фенолгипохлоритной реакции; взаимодействовать с реактивом Фолина—Дениса;
|
|
- прямые фотометрические, базирующиеся на регистрации абсорбции мочевой кислоты при длине волны 293 нм;
- энзиматические (уриказные): конечноточечные и кинетические.
В последние годы разработано энзиматическое спектрофлюориметрическое определение содержания мочевой кислоты (связанное с использованием
р-гидроксифенилуксусной кислоты в качестве флюорофора), а также калориметрические исследования — состоящие в измерении количества теплоты, выделенной в процессе протекания реакции с участием ферментов уриказы и каталазы (колориметрический ферментный метод).
Содержание мочевой кислоты исследуют также способом жидкостной и ионообменной хроматографии.
В последние годы в клинико-диагностических лабораториях для исследования содержания мочевой кислоты все более широко используются прямой спектрофото- метрический и уриказный методы определения.
Работа №11 Определение мочевой кислоты в сыворотке крови и моче.
Принцип метода Мочевая кислота окисляется кислородом воздуха при каталитическом действии уриказы с образованием Н2 О2 и алантоина. Образовавшаяся перекись водорода определяется по реакции окислительного азосочетания с 4- хлор-3 –метилфенолом и 4 – аминоантипирином в присутствии пероксидазы.