Методика проведения реакции

Для исследования понадобятся центрифужные пробирки не менее 10 мл в объеме. На дно пробир­ки наносят одну каплю стандартного универсаль­ного реагента, представляющего собой антирезусную сыворотку группы АВ (IV), содержащую 33% раствор полиглюкина. Затем туда добавляют кап­лю исследуемой крови или эритроцитов. После этого содержимое размазывают по внутренней по­верхности пробирки круговыми вращениями про­бирки, добиваясь, чтобы содержимое растеклось по стенкам. Это значительно ускоряет агглютинацию. Агглютинация наступает обычно в течение первой минуты, но наблюдать следует не менее 3 минут, чтобы успел образоваться устойчивый комплекс «антиген-антитело» и агглютинация проявилась отчетливо.

После этого в пробирку добавляют 2-3 мл фи­зиологического раствора и перемешивают путем однократного или двукратного перевертывания про­бирки, но ни в коем случае не взбалтывая ее.

Крупные хлопья на фоне просветленной жидко­сти, свидетельствующие об агглютинации, указыва­ют на резус-положительную принадлежность кро­ви. Гомогенно окрашенная розовая жидкость в про­бирке указывает на отсутствие агглютинации и на резус-отрицательную принадлежность крови.

Методика определения резус-фактора на плоскости без подогрева

На белой пластинке со смачиваемой поверхнос­тью пишут фамилию и инициалы лица, кровь кото­рого исследуется. На левом краю пластинки дела­ется надпись «сыворотка-антирезус», на правом -«контрольная сыворотка». Контрольной сывороткой служит сыворотка группы АВ (IV), разведенная аль­бумином, не содержащая антител. В соответствии с надписями на пластинке помещают по 1 - 2 капли (0,05 - 0,1 мл) реактива и резус-контрольной сыво­ротки. К обеим каплям добавляют исследуемые эритроциты. Кровь размешивают с реактивом су­хой стеклянной палочкой, размазывая ее на плас­тинке до образования капли диаметром 1,5 см. Пластинку слегка покачивают. Через 3-4 минуты для снятия возможной неспецифической агглюти­нации в каждую каплю добавляют 5-6 капель фи­зиологического раствора. После этого пластинку покачивают в течение 5 минут.

Наличие хорошо выраженной агглютинации в капле свидетельствует о резус-положительной принадлежности крови, отсутствие агглютинации (гомогенная окраска) - о резус-отрицательной.