Цервикальное осеменение с ректальной фиксацией шейки матки (ректо-цервикальный метод)

Корове или телке сперму вводят в шейку матки с помощью стерильных одноразовых пластмассовых, стеклянных или металлических инструментов без применения влагалищного зеркала, фиксируя шейку матки рукой через прямую кишку. Для искусственного осеменения коров и телок цервикальным способом с ректальной фиксацией шейки матки в набор инструментов входят: стерильная полистироловая или стеклянная пипетка длиной 450 мм с наружным диаметром 5 и внутренним — 1,8—2 мм; стерильный пластмассовый двухграммовый шприц с соединительной муфтой (полиэтиленовой, резиновой), Для выталкивания спермы можно использовать также полиэтиленовую ампулу, резиновый или пластмассовый баллончик; полиэтиленовые перчатки длиной 850 мм с толщиной пленки 30—40 микрометров. Можно также пользоваться акушерской резиновой перчаткой; при осеменении спермой, замороженной в соломинках (пайеттах), применяют инструмент (пистолет), состоящий из ручки, трубки, поршня и фиксатора, а также специального полихлорвинилового защитного чехла для трубки пистолета, который используется одноразово.

Сначала один из углов пакета, в котором герметизированы стерильные пипетки, протирают тампоном, смоченным 96°-ным спиртом. Затем угол пакета прорывают пипеткой изнутри либо надрезают стерильными ножницами. Из пакета выталкивают часть пипетки и на ее конец надевают баллончик, ампулу или шприц с муфтой. После этого пипетку вынимают полностью, а открытый угол пакета оплавляют пламенем спички либо, завернув угол, скрепляют скрепкой, резиновым кольцом и др. Затем при помощи шприца (баллончика, ампулы) во внутренний канал пипетки набирают сперму (1—1,2 мл).

После того как техник наденет на одну руку полиэтиленовую перчатку, он увлажняет ее теплой мыльной водой. Этой рукой он раскрывает срамные губы животного и, не касаясь их пипеткой, вводит пипетку другой рукой снизу вверх до верхнего свода влагалища, а затем горизонтально, до упора в область шейки матки. Придерживая пипетку горизонтально, руку в перчатке вводит в прямую кишку и при необходимости освобождает ее от фекальных масс. Если конец пипетки попал в складку влагалища, его освобождают и придвигают к наружной части шейки матки. Затем необходимо исследовать состояние матки и яичников, при этом производится легкий массаж матки. Убедившись в целесообразности проведения осеменения

животного, техник фиксирует шейку матки кистью руки и под контролем пальцев вводит пипетку в цервикальный канал. Введя пипетку в цервикальный канал, он кистью руки захватывает

Рис. 4. Введение пипетки в переднюю треть шейки матки

шейку матки и, вращая ее в разные стороны, продвигает пипетку в переднюю часть шейки матки (рис. 4). Сперму выдавливает, нажимая на баллончик (ампулу или поршень шприца). После осеменения полистироловую пипетку и полиэтиленовую перчатку уничтожают. Полиэтиленовые шприцы, стеклянные пипетки, резиновые перчатки и баллончики после соответствующей обработки и стерилизации можно использовать многократно. 3.Мано-цервикальный способ осеменения

Мано-цервикальный способ осеменение коров заключается во введении инструмента в половые пути непосредственно рукой, защищенной стерильной перчаткой. Для осеменения телок этот метод не используется, так как при введении руки во влагалище его можно травмировать. При этом способе осеменения сперму в полиэтиленовой ампуле, соединенной со стерильным полиэтиленовым катетером, вводят на достаточную глубину в канал шейки матки.

Для осеменения коров мано-цервикальным способом в набор инструментов входят: стерильная полиэтиленовая перчатка; стерильная ампула из нетоксичного для спермы полиэтилена, имеющая форму усеченного конуса длиной 48 мм; стерильный катетер из нетоксичного для спермы полиэтилена

Техник по искусственному осеменению достает стерильную ампулу с катетером, наполняет ее спермой и и укладывает на стерильную подставку, затем надевает стерильную полиэтиленовую перчатку, смачивает ее 0,9% -ным раствором хлористого натрия или 1%-ным раствором двууглекислой соды, осторожно вводит руку во влагалище коровы и определяет степень раскрытия шейки матки.

Рис. 5. Положение катетера при      введении спермы  1— яичник, 2 — яйцевод, 3 — рог матки, 4 — тело матки, 5 — разрез шейки матки, 6 — наружное отверстие шейки матки, 7 — влагалище,              8 — широкая маточная связка,  9 — катетер,     10 — прямая кишка, 11 — мочевой пузырь,           12 — дно таза, 13 — крестец, 14 — подвздошная кость

Затем пальцами в течение 1 мин производит массаж влагалищной части шейки матки. Вызвав сокращение матки, техник, не вынимая руки из влагалища, другой рукой подает подготовленный для осеменения инструмент. Массируя шейку матки кончиками пальцев,

подталкивает ампулу ладонью до тех пор, пока катетер полностью (на глубину 6—7 см) не войдет в канал шейки матки После этого приподнимает ампулу вверх на 2—3 см (угол наклона 15—20°) и выдавливает из нее сперму большим и указательным пальцами (рис. 5) в момент расслабления шейки, т. е. всасывающего действия матки. Не разжимая ампулы, техник извлекает катетер из канала шейки матки и, положив инструмент на дно влагалища, дополнительно массирует шейку матки. Вынимать руку с катетером нужно осторожно.

Инструменты и перчатку после осеменения каждой коровы уничтожают. После осеменения коров и телок необходимо выдерживать на привязи или в стойле (в летнее время под навесом) отдельно от стада до прекращения признаков охоты.

Осеменение коров и телок при самопроизвольном введении спермы во время отрицательного давления в матке. В данном случае производят все манипуляции, как при ректо-цервикальном осеменении коров. Однако после введения пипетки в цервикальный канал удаляют руку из прямой кишки, снимают перчатку и массируют область спины коровы, чтобы возбудить центры маточных сокращений. После успокоения животного и согревания спермы в пипетке от последней отделяют шприц, оставляя наружный конец пипетки открытым. Наблюдают за столбиком спермы, который слегка колеблется, и вследствие отрицательного внутриматочного давления сперма плавно поступает в матку.

Для увеличения эффективности осеменений и текущего контроля состояния репродуктивных органов животных лучше использовать одноразовые инструменты в сочетании с ректо-цервикальным осеменением.

 

ПОРЯДОК РАЗМОРАЖИВАНИЯ И ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА СПЕРМЫ

Размораживание (оттаивание) и оценку спермы проводят в лаборатории пункта при температуре 18-20°С. Все инструменты и стеклопосуда, используемые при размораживании спермы, должны быть стерильными, сухими и теплыми.

Для оттаивания гранул необходимо:

а) подготовить нужное количество пенициллиновых флаконов и пробок к ним. Флаконы моют в 2-3 %-ном растворе двууглекислой соды (20-30 г на 1 л воды), затем отмывают от соды проточной водой, ополаскивают дистиллированной водой и стерилизуют в сушильном шкафу при температуре 160-180°С в течение 45 мин. Хранят флаконы в стеклянной банке с притертыми пробками или в целлофановых мешочках. Резиновые пробки к флаконам промывают таким же образом, но стерилизуют кипячением в течение 15 минут;

б) подготовить микроскоп к работе. Для этого протереть оптические части микроскопа фланелевой салфеткой. Установить нужную степень увеличения (180-300 раз) и освещение микроскопа с помощью осветителя ОИ-31 или электролампочки. Подключить и установить электрообогревательный столик или столик с водяным обогревом температуры 40-42°С;

в) подготовить водяную баню с температурой воды 40-42°С или отрегулировать на эту же температуру специальный оттаиватель (в качестве оттаивателя можно использовать электрический подогреватель детского питания). Поставить в водяную баню или оттаиватель пенициллиновые флаконы, налив в них по 1 мл 2,9 %-ного раствора лимоннокислого натрия (цитрата натрия) и прогреть в течение 2-3 мин., чтобы раствор принял температуру водяной бани;

г) открыть сосуд Дьюара, охладить пинцет (корнцанг) в жидком азоте. Поднять мешочек с гранулами до нижнего уровня горловины сосуда (линия обындевения), быстро извлечь охлажденным пинцетом гранулу из мешочка и поместить ее во флакон с цитратом натрия, где температура 38-40°С. На перенос из мешочка во флакон должно затрачиваться не более 5 секунд, а нахождение мешочка с гранулами спермы в горловине сосуда - не более 11 секунд. Не вынимая флакона из водяной бани, слегка покачивать его, потому что около гранулы образуется зона холода, где температура значительно ниже требуемой. Оттаивать гранулу спермы необходимо в течение 8-10 секунд. Флакон с размороженной спермой сразу же вынимают из водяной бани и ставят на стол, предварительно смешав сперму легким покачиванием флакона. В одном флаконе разрешается размораживать только одну гранулу. При осеменении телок или старых коров, когда требуется двойная доза спермы, размораживают одновременно две гранулы в разных флаконах, а затем из них набирают в шприц 2 мл. От размораживания спермы до ее использования должно проходить не более 10-15 минут;

д) перед осеменением проверить качество спермы, для этого стерильной стеклянной палочкой перенести каплю на теплое предметное стекло, накрыть ее покровным стеклом и установить предметное стекло на обогревательный столик микроскопа. Макро винтом микроскопа опустить тубус до предметного стекла и, смотря в окуляр, вращением винта медленно поднимать тубус вверх. Увидев движение спермиев, определяют их активность по лучшему полю зрения.

Для осеменения коров и телок допускается размороженная сперма с активностью спермиев не ниже 3 баллов, т. е. в поле зрения микроскопа должно находиться не менее трех спермиев с прямолинейно-поступательным движением.

Во избежание снижения качества спермы не допускается преждевременное ее оттаивание и повторное замораживание. Даже кратковременное повышение температуры гранул, например, при перекладывании их из стационарного хранилища в транспортный сосуд Дьюара или из сосуда в сосуд, вредно отражается на качестве спермы. Поэтому до использования сперму постоянно необходимо хранить в жидком азоте. Нарушение этого правила приводит к гибели спермиев.

 

ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С ЖИДКИМ АЗОТОМ И СОСУДАМИ ДЬЮАРА

При переходе на новую технологию работы с применением глубокозамороженной спермы на пунктах искусственного осеменения ее сохраняют в сосудах Дьюара, заполненных жидким азотом, который имеет температуру -196°С. В таблице приведена техническая характеристика сосудов Дьюара, применяющихся в практике искусственного осеменения. В случае несоблюдения техники безопасности при работе персонала с жидким азотом и сосудами Дьюара возможны следующие отрицательные последствия:

- отморожение открытых участков тела при контакте с охлажденными поверхностями или попадании жидкого азота;

- головокружение, обморок или удушье из-за снижения концентрации кислорода в воздухе при испарении большой массы жидкого азота;

- взрыв сосуда Дьюара вследствие внезапной потери вакуума, быстрой десорбции газов при отогревании сосуда, а также из-за испарения жидкого азота при герметически закрытой горловине;

- конденсация на охлажденных жидким азотом поверхностях кислорода воздуха и возгорание при контакте с горючими материалами.

В связи с этим обращаться с сосудами Дьюара необходимо осторожно, в соответствии с инструкцией по их эксплуатации. При падении, ударах, резких толчках и т. п. может произойти нарушение целостности наружного кожуха или внутреннего сосуда, что сопровождается потерей вакуума.

Признаком такой неисправности является быстрое испарение жидкого азота и обледенение наружного кожуха. Эксплуатировать или отогревать в рабочих помещениях неисправные сосуды Дьюара категорически запрещается. Потерявший вакуум сосуд Дьюара надо освободить от хранимой спермы и жидкого азота, а затем поставить на отогревание в течение трех суток в помещение, куда запрещен доступ людям.

Сосуд Дьюара устанавливается в лаборатории пункта у окна с форточкой, через которую заправляется сосуд и проветривается помещение. Нельзя плотно закрывать горловину сосуда. При отсутствии испарения сосуд может взорваться.

При транспортировке сосуды Дьюара и находящиеся рядом предметы необходимо надежно закреплять во избежание падений, повреждений или проливания жидкого азота

При заправке азотом сосуда техник должен надеть защитные очки и рукавицы Шланг во время заправки опускается до дна сосуда, чтобы избежать выбрызгивания азота из сосуда. Не допускать соприкосновения обнаженных участков тела с металлическими предметами, извлеченными из азота. При попадании азота на незащищенный участок кожи надо немедленно обмыть этот участок водой. В период заправки сосуда нельзя заглядывать в его горловину Строго запрещается допускать посторонних лиц, особенно детей, к сосуду с азотом.

Вводить пинцет, канистру и другие предметы в жидкий азот надо медленно во избежание разбрызгивания азота, вызванного «кипением» его при контакте с теплыми предметами (азот «кипит» при -196°С)

Уровень азота в сосуде постоянно измеряется мерной линейкой или палкой. Азота в сосуде не должно оставаться менее 1/4 объема сосуда.

 

 

УЧЕТ И ОТЧЕТНОСТЬ НА ПУНКТАХ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ

Технику по искусственному осеменению коров и телок необходимо вести следующий учет:

а) журнал отелов и осеменений коров и телок, по установленной форме; картотеку с индивидуальными карточками животных; настенный календарь техника - осеменатора.

б) журнал приема спермы, жидкого азота и цитрата натрия. Со спермой, сохраняемой в жидком азоте и доставляемой на пункт, станцией передаются три накладные в двух экземплярах: на сперму, жидкий азот и цитрат натрия, из которых техник - осеменатор по одному экземпляру с отметкой качества спермы и росписью в получении возвращает на станцию. Одновременно техник делает заявку на сперму в количестве, необходимом для осеменения животных, с учетом срока заправки сосудов и доставки спермы, согласно утвержденному графику.

Журнал постоянно хранится на пункте, накладные в конце месяца сдаются в бухгалтерию хозяйства для проведения взаиморасчетов с обслуживающей станцией;

в) ежедневный учет приплода от искусственного осеменения с указанием пола, инвентарного номера с ежемесячным представлением отчета в контору хозяйства и обслуживающую станцию (племпредприятие);

г) ежемесячно отчитывается о работе пункта искусственного осеменения перед районным управлением сельского хозяйства и обслуживающей станцией (племпредприятием) по установленной форме. Предварительные результаты оплодотворяемости от искусственного осеменения учитываются:

- по повторному проявлению половой охоты - в период между 18-28 днями, считая от даты последнего осеменения;

- по ректальному исследованию коров и телок на стельность - через 2-2,5 месяца после осеменения; результаты ректальных исследований заносят в журнал и в индивидуальную карту осеменения коровы.

Исследования на стельность оформляются актом, подписанным ветеринарным врачом хозяйства (акушером-гинекологом), техником, бригадиром или заведующим фермой, который представляется в контору хозяйства.

Для информации работников животноводства о состоянии воспроизводства стада на ферме техники -осеменаторы могут вести стенд эффективности искусственного осеменения коров и телок, или  стенд воспроизводства стада.

 

 

Составитель: Василий Анатольевич Напримеров

 

 

ОСНОВЫ ИСКУССТВЕННОГО ОСЕМЕНЕНИЯ