Гр.: качественные методы (пробы)

· Проба Ланге

· Модифицированная проба Ротеры

· Проба Легаля

· Проба Лестраде

Гр.: полуколичественные методы

· Экспресс-тесты (диагностические тест-полоски)

Принцип обнаружения кетоновых тел в моче. Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами, образуя комплекс, окрашенный в розовато-сиреневый, сиреневый или фиолетовый цвет. Чувствительность проб около 50 мг/л кетоновых тел. Полуколичественную оценку результатов можно дать в интервале от 150 до 1500 мг/л.

Задание №1. Определение кетоновых тел в моче с помощью пробы Ланге.

Принцип метода: Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами с образованием комплекса красно-фиолетового цвета.

Посуда, реактивы, оборудование:

· Химическая пробирка;

· Секундомер (часы);

· Реактивы:

1. Уксусная кислота 80%.

2. Нитропруссид натрия (свежеприготовленный 10% раствор).

3. Аммиак.

Ход исследования:

К 12 – 15 мл мочи приливают около 1 мл уксусной кислоты и около 0,5 мл раствора нитропруссида натрия. Затем наслаивают аммиак.

Интерпретация полученных результатов:

В положительном случае на границе двух жидкостей образуется фиолетовое кольцо. Кольцо может появиться не сразу, а в течение 2 – 3 мин.

Другая модификация этой пробы удобна тем, что можно использовать готовый реактив нитропруссида натрия.

Приготовление реактива: 6 г нитропруссида натрия растворяют в 100 мл 30% уксусной кислоты.

Ход исследования:

Интерпретация полученных результатов:

К 5 – 6 мл мочи прибавляют несколько капель реактива (до цвета чая) и наслаивают аммиак.

В положительном случае на границе жидкостей появляется фиолетовое кольцо.

Зарисуйте схему пробы Ланге

 

 

Задание №2.

Определение кетоновых тел в моче с помощью модифицированной пробы Ротеры.

Принцип метода:интенсивность окраски рабочего раствора позволяет ориентировочно судить о концентрации кетоновых тел в моче.

Посуда, реактивы, оборудование:

· Химическая пробирка;

· Секундомер;

· Реактивы:

· Нитропруссид натрия, раствор 50 г/л; готовят перед использованием.

· Аммония сульфат.

· Аммиак водный – 25% раствор.

Ход исследования:

Приблизительно 200 мг сухого сульфата аммония, 5 капель мочи и 2 капли раствора нитропруссида натрия тщательно смешивают в пробирке, а затем на эту смесь тщательно наслаивают 10 – 15 капель раствора водного аммиака.

Интерпретация полученных результатов:

При наличии кетоновых тел на границе раздела в течение 3 – 5 мин образуется красно-фиолетовое кольцо, интенсивность окраски которого позволяет ориентировочно судить о концентрации кетоновых тел в моче (см. таблицу).

При незначительной концентрации кетоновых тел слабое кольцо может появиться на 8 – 10 минуте.

Ориентировочная количественная оценка кетоновых тел в моче.

 

Интенсивность окраски

Обнаруживаемые вещества, г/л Ацетоуксусная кислота

Следы 0,05

Умеренная 0,3

Интенсивная 0,8

Задание №3.

Определение кетоновых тел в моче с помощью пробы Легаля.

Принцип метода: нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами с образованием комплекса слабо-розового или красного цвета.

Посуда, реактивы, оборудование:

· Химическая пробирка;

· Реактивы:

· Свежеприготовленный 5% водный раствор нитропруссида натрия.

· 10 – 15% раствор едкого натрия.

· Уксусная кислота ледяная.

Ход исследования:

К 5 – 6 мл мочи прибавляют несколько капель реактива № 1 и 0,5 мл реактива № 2. Получается красное окрашивание. Добавляют 0,5 – 1 мл реактива № 3.

Интерпретация полученных результатов:

Если красный цвет исчезает, проба отрицательная, если сохраняется – положительная. Если получается слабо-розовая окраска, то проба считается также положительной.

Задание №4.