Сбор и хранение инфекционного материала

Для инфицирования растений любым способом к моменту искусственного заражения необходимо иметь жизнеспособный ино-кулюм в достаточном количестве. Возбудителей грибных болезней обычно собирают с пораженных растений восприимчивых сортов или выращивают и размножают на питательных субстратах. Обычно облигатные паразиты, такие, как мучнисторосяные и ржавчинные грибы, возбудители многих пероноспорозов очень трудно поддаются выращиванию на искусственных питательных средах. Поэтому их собирают с пораженных растений; споры мучнисто-росяных грибов стряхивают мягкой кисточкой, урединиоспоры возбудителей ржавчин всасывают с помощью металлических или стеклянных циклонных насадок, смонтированных с водоструйным насосом, пылесосом или воздушным фильтром автомобиля. Иногда урединиоспоры смывают с пораженных растений водой. Споры возбудителей ложных мучнистых рос чаще всего смывают водой, поскольку они некоторое время очень хорошо переносят пребывание в водной среде.

Споры большинства грибных возбудителей нельзя хранить длительное время, поэтому сразу после сбора их нужно использовать для инокуляции. Есть ряд исключений по отношению к некоторым возбудителям. В частности, урединиоспоры ржавчинных грибов, собранные сухими, после соответствующей обработки сохраняют жизнеспособность в течение нескольких месяцев. С этой целью их после сбора способом всасывания очищают от механических примесей, подсушивают и помещают в стеклянные ампулы, которые затем запаивают. Хранят ампулы со спорами при температуре 3...5 °С. В таком режиме хранения по истечении 2...2,5 мес жизнеспособными остаются примерно 70 % урединиоспор, а после 6-месячного хранения — 40 %.

Урединиоспоры можно также высушить сублимационным способом и хранить в запаянных стеклянных ампулах при температуре 0...5 °С гораздо более длительное время. Перед инокуляцией такие споры извлекают из холодильника и подвергают гидратации в водяной бане при 20 °С в течение 2 мин. У некоторых фитопато-генных грибов споры или другие формы, служащие для размножения, еще более выносливые, чем урединиоспоры. Так, устооспоры возбудителя твердой головни пшеницы, находящиеся в головневых мешочках, можно сохранить в сухом прохладном помещении в течение нескольких лет.

Ряд грибных возбудителей образуют в цикле развития скле-роции. Эта покоящаяся форма мицелия крайне устойчива к неблагоприятным внешним условиям без потери жизнеспособности. Поэтому склероции этих грибов собирают и могут хранить несколько лет. При надобности создают условия для прорастания склероциев и получения тех форм, которые могут вызвать заражение растений. В виде склероциев хранят возбудителей рака клевера, склеротиниоза и тифулеза зерновых культур, белой гнили овощных культур, подсолнечника и ряда других растений.

Возбудителей мучнистых рос злаковых культивируют на молодых растениях ячменя. Гриб можно поддерживать в живом состоянии даже на проростках восприимчивых сортов, растущих в пробирках размером 25 х 300 мм. В таком состоянии возбудитель сохраняется в течение 1... 1,5 мес в холодильных камерах (при 12 °С), оборудованных освещением. Для более длительного хранения гриб периодически с интервалом 1... 1,5 мес переносят на новые проростки.

Патогенов, вызывающих ложные мучнистые росы, размножают на вегетирующих растениях восприимчивых сортов с таким расчетом, чтобы непосредственно перед инокуляцией у них было хорошо развито конидиальное спороношение, которое смывают водой.

Очень многие грибные патогены способны расти и размножаться на питательных субстратах в лабораторных условиях. Выбор конкретной питательной среды для размножения таких грибов зависит от их видовой принадлежности, способности хорошо и быстро развиваться и давать большое количество инфекционных единиц (чаще спор). Перед использованием их в качестве инокулюма проверяют агрессивность возбудителя, заражая им восприимчивые сорта.

Фитопатогенные бактерии можно успешно культивировать в лабораторных условиях на питательных средах. Бактерии характеризуются небольшой избирательностью по отношению к виду питательного субстрата. Для искусственного заражения растений обычно пользуются водной суспензией бактериальных клеток нужной концентрации.

Жизнеспособность возбудителей вирусных болезней поддерживают на живых растениях, которые легко ими поражаются и в тканях которых вирусные частицы накапливаются в высоких концентрациях. Такие растения называют растениями-накопителями. Инфекцию с них переносят на испытуемые растения с помощью ранее перечисленных методов, выбор которых зависит от способа передачи конкретного фитопатогенного вируса.