3 реакция – дегидрирование и прямое декарбоксилирование изолимонной кислоты.
Реакция катализируется НАД+–зависимым ферментом изоцитратдегидрогеназой. Фермент нуждается в присутствии ионов марганца (или Mg2+). Являясь по своей природе аллостерическим белком, изоцитратдегидрогеназа нуждается в специфическом активаторе – АДФ.
СООН СООН
│ │
СН2 СН2
│ │
Н―С― СОО Н СН2
│ │
Н О―С― Н С=О
│ │
СООН СООН
Изоцитрат α-кетоглутарат
4 реакция – окислительное декарбоксилирование α-кетоглутаровой кислоты.
Процесс катализируется α-кетоглутаратдегидрогеназой – ферментным комплексом, по стуктуре и механизму действия похожим на пируватдегидрогеназный комплекс. В его «распоряжении» те же коферменты: ТПФ, липоевая кислота и ФАД – собственные коферменты комплекса; КоА-SH и НАД+ – внешние коферменты.
СООН СООН
│ │
CH2 CH2
│ ТПФ, липоевая к-та, КоА-SH, ФАД, НАД+ │
CH2 CH2
│ │
C=O СО2 НАД Н·Н+ С=О
│ S-KoA