Поствитальные способы окраски

СПОСОБЫ ОКРАСКИ НА ВЫЯВЛЕНИЕ БАКТЕРИЙ, ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ СРЕЗОВ

Красители

Метиленовый синий — темно голубой щелочной (oснóвный) и нефлюоресцирующий краситель из группы фенотиазина (тригидрат хлорида тетраметилентионина).

толуидиновый синий — toluidine blue толуидиновый синий, щелочной (oснóвный) цитохимический краситель

конго красный (Congo red) - темно-красный или краснокоричневый краситель, который приобретает синюю окраску в кислой среде. Применяется в гистологии в качестве красителя. Если более 60% красящего вещества исчезает из крови в течение часа после его введения, это свидетельствует о наличии у человека амилоидоза*; (син. конгорот) бензидиновый краситель, широко применяемый в гистологической технике, напр. для прижизненного выявления амилоида, окрашивания эластических волокон, кератина.

* АМИЛОИДОЗ - белково-углеводная дистрофия; образование и системное (или локальное) отложение в тканях белкового вещества амилоида; обусловлено генетически (напр., при периодической болезни); может возникать как осложнение хронических инфекций (напр., остеомиелита) и т. д.

фуксин Пфайффера (карболовый) — гистологический краситель, состоящий из спиртового раствора фуксина в 5% карболовой воде

(см. Окраска патологической (токсигенной) зернистости по Фреифельд – способ приготовления: 1 г щелочного фуксина растворяют при слабом нагревании в 15 г 96° этилового спирта, охлаждают и к спиртовому раствору добавляют 100 мл 5% раствора карболовой кислоты).

Витальный способ окраски

Для витального (прижизненного) крашения применяют 0,2-0,001 % водные растворы метиленового и толуоидинового синего, и конго красный, которые добавляют в придавленную или висячую капли культуры. Этим способом выявляют спирохеты, простейшие, определяют подвижность бактерий, иммунное набухание капсулы, но использование его требует строгого соблюдения правил, исключающих лабораторное заражение.

Поствитальные способы окраски

Способы окраски фиксированных препаратов (поствитальные) разделяют на простые и сложные. При простых способах красящие растворы фуксина Пфейффера (экспозиция 1-2 мин), щелочного метиленового синего (3-5 мин) наносят на фиксированный препарат, так, чтобы он полностью покрыл мазок, краситель сливают, препарат промывают струйкой воды, встряхивают, высушивают и микроскопируют.

Простые способы позволяют судить о величине, форме, локализации, взаимном расположении отдельных клеток, но с их помощью нельзя установить структуру микробов и часто их дифференцированное отношение к красителям.

Из сложных способов окрашивания бактерий в основном используют дифференцированный способ Грама, выявление кислотоустойчивости по Цилю — Нельсону, определение волютиновых зёрен по Леффлеру или Нейссеру, дифференцирующий способ Романовского — Гимзы, негативно-позитивный способ определения капсулы по Гинсу — Бурри, выявление спор по Пешкову или Цилю — Нельсону и др. Для окраски простейших применяют способ Романовского —Гимзы. Грибы исследуют неокрашенными или способами Грама, Циля — Нельсона, Леффлера, Романовского — Гимзы, а также раствором Люголя и др.