- На фиксированный мазок наливают синьку Леффлера и дают краске закипеть. Окрашивание мазка происходит кипящей синькой в течение 20 – 30 с.
- Препарат промывают водой.
- Докрашивают 0,5%-ным водным раствором нейтральрота в течение 30 – 60 с.
- Промывают водой и высушивают.
Споры, окрашенные синькой Леффлера, имеют голубой цвет, вегетативные тела бактерий – красный цвет.
Окраска по методу Ожешко для выявления спор
- На высушенный нефиксированный препарат (мазок готовится толстым и на краю стекла) наливают несколько капель 0,5%-ного раствора соляной кислоты и подогревают 1 – 2 мин. над пламенем горелки до закипания, после чего остатки кислоты сливают.
- Остывший препарат промывают водой, подсушивают на воздухе и фиксируют на пламени горелки.
- Окрашивают карболовым фуксином Циля (фуксин наливают на фильтровальную бумажку) с подогреванием до появления паров.
- Обесцвечивают 5%-ным раствором серной кислоты в течение нескольких секунд.
- Промывают водой.
- Докрашивают синькой Леффлера или 1%-ным водным раствором малахитовой зелени в течение 3 – 5 мин.
Споры, окрашенные фуксином, имеют рубиново-красный цвет, вегетативные тела микробных клеток при докрашивании синькой Леффлера – синий цвет, при применении малахитовой зелени – зеленый цвет.
Окраска по методу Бурри для выявления капсул
На узкий конец предметного стекла наносят каплю туши в петлю исследуемого материала. Смесь перемешивают тщательно петлей, делают мазок, как мазок из крови, высушивают на воздухе и, не фиксируя, микроскопируют с иммерсионной системой. Фон препарата окрашен в темно-дымчатый цвет, микробные тела и их капсулы не окрашиваются тушью и остаются бесцветными, вследствие чего этот способ получил название негативного.
Окраска по методу Гинса для выявления капсул
- Приготавливают негативно окрашенный по методу Бурри препарат.
- Фиксируют любым химическим способом: метиловым спиртом, смесью Никифорова или другими смесями.
- Промывают водой.
- Окрашивают карболовым фуксином Циля, разведенным 1:3, в течение 3 – 5 мин.
- Препарат промывают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсионной системой.
При микроскопировании на темном фоне препарата контрастно выделяются неокрашенные капсулы, внутри которых находятся бактерии ярко-малинового цвета.
_________________________________________________________________________________
Иммерсионная система — оптическая система, в которой пространство между первой линзой и предметом заполнено жидкостью. Применяемая таким образом жидкость называется иммерсионной.
_________________________________________________________________________________