Справочные и теоретические материалы. F.tularensis – возбудитель туляремии – природно-очаговой инфекции, резервуаром которой являются многие виды преимущественно мелких диких позвоночных животных

F.tularensis – возбудитель туляремии – природно-очаговой инфекции, резервуаром которой являются многие виды преимущественно мелких диких позвоночных животных (представителей четырех основных семейств – мышевидных, заячьих, беличьих и тушканчиковых). На территории России основными носителями являются мышевидные грызуны: водяные крысы, ондатры, различные виды полевок.

Классификация.

Тип BXIII Proteobacteria. Класс III γ-Proteobacteria

Порядок V Thiotrichales. Семейство III Francisellaceae.

Род Francisella. Виды: Francisella tularensis и F. philomiragia

Вид F. tularensis представлен подвидами: F. tularensis subsp. tularensis (тип A), F. tularensis subsp. holarctica (тип В), F.tularensi subsp. mediaasi-atica, F. tularensis subsp. novicida. Подвиды заметно различаются по вирулентности и по географии распространения. Однако имеют сходную антигенную структуру.

Морфология. Франциселлы – мелкие кокковидные или элипсоидные полиморфные палочки, неподвижные, грамотрицательные, не образующие спор.

Культуральные свойства. Строгие аэробы, оптимум температуры около +37 градусов Цельсия, pH – близкая к нейтральной. Культивируют на агаровых и желточных средах сложного состава с добавлением цистеина, глюкозы, крови. Рост медленный. Образуют мелкие колонии, напоминающие капельки росы, круглые с ровным краем, выпуклые, блестящие, с голубоватым отливом.

Биохимические свойства. Слабо ферментируют до кислоты без газа некоторые углеводы (глюкозу, мальтозу, левулезу, маннозу), образуют сероводород.

Антигенные свойства. F.tularensis в S (вирулентной) форме имеет два основных антигенных комплекса – О-антиген (обнаруживает сходство с О-антигенами бруцелл) и Vi (капсульный) антиген. Диссоциация Sà R приводит к утрате капсулы, вирулентности и иммуногенности.

Эколого-эпидемиологические особенности. На территории России выделено 7 основных ландшафтных типов природных очагов туляремии: пойменно-болотный, луго-полевой, степной, лесной, предгорно-ручьевой, тундровый и тугайный (пойменно-пустынный) со своими основными хозяевами возбудителя и эколого-эпидемиологическими особенностями. Человек очень чувствителен к туляремийному микробу, минимальная инфицирующая доза – одна микробная клетка. Животные по чувствительности к этому микроорганизму разделены на четыре группы. Особое значение в условиях Западной Сибири имеют водяные крысы и ондатры. Заражение человека может происходить путем контакта с грызунами или инфицированными ими предметами, алиментарным путем (инфицированные грызунами вода и пищевые продукты), воздушно-пылевым путем, трансмиссивно (иксодовые клещи и другие кровососы). Н.Г.Олсуфьев выделяет две экологические формы возбудителя – “сухопутную”, характеризующуюся передачей через иксодовых клещей (все три подвида), и “водную”, связанную с околоводными видами грызунов и другими организмами – гидробионтами, с преимущественной передачей через воду и укусы комаров (голарктический подвид).

Клинико-патогенетические особенности. Возбудитель туляремии является внутриклеточным паразитом. Его вирулентность обусловлена:

- капсулой, угнетающей фагоцитоз;

- нейраминидазой, способствующей адгезии;

- эндотоксином (интоксикация);

- аллергенными свойствами клеточной стенки;

- способностью размножаться в фагоцитах и подавлять их киллерный эффект;

- наличием рецепторов к Fc-фрагменту IgG, подавлять активность систем комплемента и макрофагов.

Франциселлы проникают в организм через кожу и слизистые глаз, рта, дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта. В патогенезе туляремии можно выделить следующие стадии:

1. Внедрение и первичная адаптация возбудителя.

2. Лимфогенный занос.

3. Первичные регионарно-очаговые (туляремийный бубон) и общие реакции.

4. Гематогенные матастазы и генерализация.

5. Вторичная полиочаговость.

6. Реактивно-аллергические изменения.

7. Обратный метаморфоз и выздоровление.

В ряде случаев процесс может ограничиваться первыми тремя фазами.

Основными клиническими формами туляремии являются: язвенно-бубонная (ульцерогландулярная), глазо-бубонная (окулогландулярная), легочная, абдоминальная, генерализованная, другие формы (в т.ч. ангинозно-гландулярная), неуточненная (международная статистическая классификация болезней, 10 пересмотр. ВОЗ, 1995).

Лабораторная диагностика. Бактериологические методы диагностики туляремии для человека имеют дополнительное значение и не всегда эффективны, что определяется биологическими особенностями возбудителя и особенностями инфекции у человека (малая концентрация возбудителя в органах и тканях). Биопроба является намного более эффективным методом диагностики. Материал от больного (пунктат бубона, выделения с конъюнктивы, пленка с миндалин, мокрота и др.) используют для заражения лабораторных животных (чаще белых мышей), из органов павших животных делают высевы на питательные среды, культуру идентифицируют по совокупности следующих признаков:

а) морфология клеток и грамотрицательная окраска;

б) рост на желточной среде и специальных средах и отсутствие роста – на простых мясо-пептонных средах;

в) специфическое свечение в реакции иммунофлюоресценции (МФА);

г) агглютинация культуры туляремийной сывороткой;

д) способность вызывать гибель белых мышей и морских свинок с характерными патологоанатомическими изменениями в органах и выделением чистой культуры.

Бактериологические методы и биопробы могут выполняться только специализированными лабораториями, имеющими разрешение на работу с возбудителем туляремии (2 группа патогенности). В качестве метода выявления туляремийного микроба может использоваться МФА, реакция нейтрализация антител – РНАТ, в качестве дополнительного – ПЦР.

Наибольшее значение в лабораторной диагностике туляремии имеют серологические методы – РА, РПГА. Обязательно исследование парных сывороток крови. Дополнительными серологическими методами являются ИФА, РНИФ.

Аллергодиагностика (проба с тулярином – туляремийным аллергеном) чаще используется для оценки естественного и вакцинального иммунитета. ГЗТ развивается на первой неделе болезни, а также после вакцинации и сохраняется несколько лет. У больных накожные и внутрикожные туляриновые пробы не рекомендуются в связи с возможностью ухудшения состояния больного. Могут применяться методы аллергодиагностики in vitro – реакция лейкоцитолиза, РТМЛ и др.

Специфическая профилактика. На неблагополучных по туляремии территориях применяют живую туляремийную вакцину. Иммунитет длительный, проверяется с помощью пробы с тулярином. С помощью этой пробы отбирают контингенты на вакцинацию и ревакцинацию.

В результате самостоятельной работы студент должен знать:

1. Характеристику биологических свойств возбудителя туляремии

2. Эпидемиологию, патогенез, восприимчивость и иммунитет при туляремии

3. Принципы лабораторной диагностики туляремии

4. Препараты для идентификации, лечения и профилактики туляремии

Уметь:

1. Дифференцировать возбудителей туляремии по морфологическим признакам в микропрепарате

2. Оценивать результаты серологических реакций по определению антител в сыворотке крови больных туляремией

3. Классифицировать бактериальные препараты в соответствии с их назначением