Приготовление парафиновых блоков

Для работы на микротоме из «парафиновых пряников» готовят парафиновые блоки, которые укрепляют на деревянных держа­телях. Держатели устанавливают в объектодержателе микро­тома. Блок режут на определенную толщину.

В лабораторной практике деревянные держатели иначе назы­вают кубиками. Их готовят из древесины дуба, бука, березы размером 1,5х2х2,5 см и перед употреблением пропитывают расплавленным парафином. На боковую сторону держателя приклеивают этикетку.

Готовят блоки двумя способами. В первом случае из «пря­ника» бритвой вырезают кусочки парафина с объектом и рас­плавленным парафином прикрепляют их к деревянному держа­телю. В таких блоках материал должен быть ориентирован определенным образом и окружен со всех сторон слоем пара­фина толщиной 1-2 мм. Обычно так готовят блоки, содержащие крупные эмбриологические объекты. Лезвием острой бритвы придают блоку форму параллелепипеда, грани которого парал­лельны граням держателя.

Во втором случае используют метод закапывания по С. Г. Навашину. Он более кропотлив, чем первый, но дает надежные ре­зультаты при заливке корней и мелких бутонов. Необходимо заранее приготовить для работы спиртовку, глазной зонд или серебряную проволочку, парафиновые палочки, этикетки, лезвие безопасной бритвы, скальпель, деревянные держатели и «пара­финовый пряник» с материалом.

Парафиновые палочки делают из парафина с такой же тем­пературой плавления, какую имел парафин, использованный для пропитывания материала в термостате. В парафин добав­ляют 5% воска. Расплавленный и отфильтрованный парафин заливают в коробочки из пергамента длиной 15 см, шириной 30 мм и толщиной 5-8 мм. Коробочки быстро охлаждают в во­де, снимают бумагу, а палочки хранят в пустых эксикаторах или картонных коробках.

Правильно залитый блок должен быть однородным. Это уда­ется, когда новые капли парафина наносят на иезастывшую поверхность блока. Закапывание продолжают до тех пор, пока объекты не окажутся внутри прозрачной капли, из которой при остывании не должны выступать кончики корней.

Блок вместе с держателем опускают в холодную воду. После остывания лезвием безопасной бритвы ему придают форму пра­вильного параллелепипеда или усеченной пирамиды. Обрезку парафинового блока начинают с верхней поверхности. Осторож­но снимают лишний парафин, оставляя над объектом слой 2 мм. Затем обрезают блок с боковых сторон, добиваясь, чтобы грани его были параллельны граням деревянного держателя.

Таким образом, объекты заключены в парафиновый блок определенной формы, который можно резать на микротоме.