Образец протокола

Протокол № __ ФИО студента_________ № группы (факультет) ______ Дата ____________

Цель	Метод и его содержание	Результат

Вывод: ________

Допуск до практических занятий осуществляется при наличии сменной обуви, белого халата, колпака или шапочки и оформленной в альбоме заготовки протокола выполнения практических заданий по теме текущего занятия. Кроме того, необходимо иметь отдельную тетрадь для ведения записей по семинарской части занятия.

Пропущенные занятия отрабатываются в соответствии с графиком отработок установленным кафедрой. При наличии трех и более пропусков необходимо иметь разрешение из деканата.

По каждому разделу курса предусмотрен контроль знаний в форме устного или письменного опроса по билету. Перед получением билета Вам будет предложено ответить на тестовые вопросы. Предварительное ознакомление с вопросами тестовых заданий не предусматривается.

Зачет в конце семестра выставляется при условии посещения и выполнения всех практических занятий, а также сданных на положительную оценку контрольных занятий.

Желаем успехов в изучении одной из самых интересных дисциплин в медицинском ВУЗе – микробиологии, вирусологии, иммунологии!

Преподаватели

кафедры биологии с курсом микробиологии

Тематический План практических занятий

Раздел I. История микробиологии. Морфология и физиология микроорганизмов
1.	микробиологическая лаборатория. Морфология бактерий. Техника безопасности. Микроскопический метод исследования. Простые методы окраски
2.	Клеточная стенка бактерий и грибов. Морфология грибов. Сложные методы окраски
3.	Строение бактериальной клетки. Методы выявления различных структур бактерий
4.	Питание, дыхание и размножение микроорганизмов. Бактериологический метод диагностики
5.	Питание, дыхание и размножение микроорганизмов. Бактериологический метод диагностики (продолжение)
6.	КОНТРОЛЬНОЕ ЗАНЯТИЕ №1: История микробиологии. Морфология и физиология микроорганизмов
Раздел II. Инфекция и иммунитет
7.	Инфекционный процесс. Факторы патогенности микроорганизмов. Методы изучения факторов патогенности. Биологический метод диагностики
8.	Факторы неспецифической резистентности. Изучение фагоцитоза, гуморальных факторов, барьерной функции кожи и слизистых
9.	Антигены. Реакции иммунитета. Реакции простой агглютинации, преципитации и нейтрализации
10.	антитела. Реакции иммунитета. Реакция сложной агглютинации, связывания комплемента, с использованием меченых антител (РИФ, ИФА)
11.	Формы иммунного ответа. Иммунопрофилактика и иммунотерапия. Иммунный статус. Оценка иммунного статуса
12.	КОНТРОЛЬНОЕ ЗАНЯТИЕ №2: ИНФЕКЦИЯ И ИММУНИТЕТ
Раздел III. Экология и генетика микроорганизмов
13.	Асептика и антисептика. Методы стерилизации и дезинфекции
14.	Бактериофаги. Генетика и изменчивость микроорганизмов Практическое использование бактериофагов, методы культивирования и титрования Методы изучения генетических рекомбинаций у бактерий. ПЦР
15.	Микробный антагонизм. Антибиотики. Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Практическое использование бактериоциногении
16.	Микрофлора организма человека. Дисбактериозы Методы изучения и оценки микробиоценозов человека
17.	КОНТРОЛЬНОЕ ЗАНЯТИЕ №3: экология и генетика микроорганизмов

Микробиологическая лаборатория и правила работы в ней

Микробиологические лаборатории организуются при университетах, научно-исследовательских институтах, больницах и санитарно-эпидемиологических станциях. В соответствии с типами микроорганизмов, изучаемых в лаборатории, выделяют вирусологические, бактериологические, микологические и протозоологические лаборатории. Объект изучения медицинских микробиологических лабораторий – патогенные и условно-патогенные микроорганизмы.

Возбудителей инфекционных заболеваний человека ВОЗ разделяет на несколько групп:

I группа– возбудители особо опасных инфекций (возбудитель чумы);

II группа – возбудители высококонтагиозных особо опасных инфекций (возбудители холеры, сибирской язвы и др.);

III группа – отдельные нозологические группы (возбудители коклюша, столбняка и др.);

IV группа – возбудители токсикоинфекций и интоксикации бактериальной природы, пневмонии и др;

V группа – облигатная непатогенная микробиота, населяющая слизистые.

Все лаборатории должны в обязательном порядке получать разрешение на работу с микроорганизмами каждой группы патогенности в центрах Госсаннэпиднадзора. В зависимости от степени опасности или вирулентности микроорганизмов условия работы лабораторий по-разному регламентируются.

I группа – лаборатории особого режима (высокий индивидуальный и общественный риск);

II группа – режимные лаборатории (высокий индивидуальный риск);

III группа – базовые лаборатории (умеренный общественный и индивидуальный риск);

IV группа – базовые лаборатории (минимальный общественный и индивидуальный риск).

Учебные микробиологические лаборатории относятся, как правило, к III-IV группе опасности.

Работа в микробиологических лабораториях сопряжена с опасностью заразиться самим или заразить других патогенными микроорганизмами. Сотрудники бактериологических лабораторий и кафедры микробиологии, аспиранты, студенты, слушатели ФПП и ФПК, приходящие на занятия или для работы в научных кружках, обязаны ознакомиться с правилами техники безопасности и строго их соблюдать. Правильное выполнение любой из операций невозможно без понимания теоретических основ проделываемого эксперимента. Соблюдение в совокупности всех правил обуславливает успех проведения эксперимента, гарантирует безопасность для экспериментатора и окружающих людей.

Приступая к работе в микробиологической лаборатории необходимо усвоить основные правила обращения с культурами микроорганизмов, правила эксплуатации и назначение используемых приборов и химической посуды.

Подготовка микробиологической лаборатории к работе

1. Вход в лабораторию (практикума) должен быть строго ограничен и на двери лаборатории должна висеть табличка, с надлежащим предупреждением – посторонним вход запрещен!

2. Микробиологическую лабораторию независимо ни от чего необходимо содержать в чистоте.

3. Помещение лаборатории должно быть по возможности просторным и светлым.

4. Рабочие столы должны быть поставлены так, чтобы свет падал с левой стороны или же спереди.

5. Пол, стены и мебель в лаборатории обрабатывают пылесосом и/или протирают растворами различных дезинфицирующих средств (0,5-3%-ный раствор хлорамина Б, 2-3%-ный раствор гидрокарбоната натрия).

6. Воздух в лаборатории дезинфицируют проветриванием через форточку или облучением ультрафиолетовыми лучами с l= 200-400 нм до начала работы, и после окончания (30-40 мин).

7. Рабочее место тщательно обрабатываться дезинфицирующими растворами (0,5-3%-ный раствор хлорамина, 2-3%-ный раствор гидрокарбоната натрия, 70%-ный водный раствор этанола или изопропанола).

8. На каждом рабочем месте должны находиться: штатив с пинцетом, бактериологической петлей и иглой, черный или синий маркер, набор предметных и покровных стекол, колба со стерильным бидистиллятом, стандартный набор красителей, спиртовка, микроскоп, настольная лампа, ванна с дезинфицирующим раствором, в которую помещают заразную посуду и отработанные культуры микроорганизмов.

9. Необходимо убирать с рабочего места лишние предметы и посуду.

10. При выполнении посевных работ в боксах в конце и начале рабочего дня пол, стены и потолок при отсутствии бактерицидных ламп пропариваются. Для этого в помещении бокса на плитке устанавливают открытый сосуд, наполненный 2-5 л воды, которую кипятят в течение 1,5-2,0 ч. Образующиеся пары наполняют бокс, конденсируются и, осаждаясь в виде мелких капель на стенках бокса, захватывая частицы пыли содержащие микроорганизмы. Работу в боксе можно начинать уже через 15-20 ч после окончания пропаривания.

11. Во время проведения работы двери лаборатории должны держаться закрытыми.

12. Детям вход в лабораторию не разрешается.

13. В лаборатории должны постоянно присутствовать дежурные, которые следят за порядком и несут ответственность за нарушения.

14. В случае неполадок обнаруженных на рабочем месте, необходимо незамедлительно сообщить преподавателю.

Культуру, содержащую микроорганизмы одного вида, называют чистой. Если в культуре содержится более одного вида микроорганизмов, она называется смешанной. В практике работы микробиологических лабораторий используют в основном чистые культуры, поэтому вся работа в лаборатории должна не только способствовать изучению свойств микроба, но и сохранению чистоты выделенной культуры.

Общие правила работы в микробиологической лаборатории

1. Каждый работник лаборатории должен проходить инструктаж по технике безопасности один раз в полгода.

2. В лаборатории не разрешается курить, принимать пищу, употреблять напитки и жевательную резинку.

3. Вход в лабораторию разрешается только в сменной обуви, белом халате и головном уборе (шапочка), при необходимости используют косынки и колпаки. Халат должен быть застегнут, волосы подобраны.

4. Выходить за пределы лаборатории в халатах строго запрещено.

5. При себе всегда необходимо иметь личное полотенце, перед началом и по окончанию работы следует обязательно вымыть руки с мылом.

6. Необходимо рационально строить свою работу и продумывать выполнение каждой операции на несколько действий вперед.

7. В лаборатории обязательно должны находиться средства индивидуальной защиты и аптечка.

8. Перед началом работы проверить исправность приборов (газовых и спиртовых горелок).

9. При возникновении локального возгорания нерастворимых в воде веществ, следует немедленно накрыть пламя асбестовым одеялом или засыпать песком.

10. Работать с дурно пахнущими веществами следует под тягой.

11. Бутыль с дистиллированной водой должен быть тщательно закрыт обработанной корковой пробкой, долгое хранение дистиллята не допускается.

12. Спиртовку поджигают осторожно спичкой, предварительно поправив фитиль пинцетом; по окончанию работы нельзя задувать пламя спиртовки, следует просто накрыть пламя колпачком.

13. Не разрешается зажигать одну горелку от другой во избежание взрыва. Для зажигания горелок используются только спички.

14. Включать электроприборы следует осторожно и сухими руками, в случае не исправности необходимо их немедленно обесточить.

15. Нагревание жидкостей, плавление твердых веществ на электроплитках проводят строго на асбестовой сетке или одеяле.

16. При расплавлении агаризованных питательных сред, нагревании легковоспламеняющихся жидкостей используют водяные бани.

17. Не следует находиться в лаборатории при включенном бактерицидном облучателе.

18. Во время работы с концентрированными кислотами, щелочами и хромовой смесью используйте защитные очки и перчатки.

19. Помните, что при приготовлении растворов кислот, следует наливать кислоту в воду, а не наоборот.

20. Запрещается работа с пипеткой при помощи рта.

21. Необходимо проводить обработку рабочих поверхностей дезинфицирующими средствами не менее 1 раза в день и после каждого попадания на них потенциально инфекционного материала.

22. Инфицированные материалы, предназначенные для автоклавирования или сжигания вне лаборатории, должны быть помещены в прочные непромокаемые контейнеры, которые закрывают перед удалением из лаборатории.

23. Проводить все виды работ, при которых возможен прямой контакт с кровью, инфекционным материалом и инфицированными животными, в резиновых перчатках.

24. При попадании исследуемого материала на руки, стол или другие предметы их обрабатывают дезинфицирующим раствором.

25. Работать с накопительными культурами хемоорганогетеротрофов следует осторожно, т.к. они могут содержать и патогенные микроорганизмы.

26. Посуду с культурами микроорганизмов подлежащую выбрасыванию или мытью, обязательно автоклавируют, культуры на плотных питательных средах можно залить на сутки дезинфицирующим раствором, после чего их выбрасывают и моют посуду.

27. Перед уходом из лаборатории необходимо обесточить все приборы и провести тщательную уборку помещения.

Правила работы с культурами микроорганизмов

1. Все склянки с культурами микроорганизмов должны быть четко подписаны, указывают род, вид микроорганизма, дату и время посева.

2. Перед тем как открыть склянку с культурой микроорганизма, обязательно обжигают (фламбируют) ее края в пламени спиртовки.

3. Посевы микроорганизмов I и II групп патогенности, а также биоматериала с подозрением на инфицирование указанными группами микроорганизмов производят, как и все работы с кровью в ламинарном боксе II класса защиты.

4. При пересеве микроорганизмов с жидкой питательной среды на твердую или жидкую, культуральную жидкость набирают стерильной пипеткой, используя резиновую грушу.

5. Все операции с предметными стеклами выполняются пинцетом, или при необходимости зажимаются покроям между большим и указательным пальцем.

6. Клетки микроорганизмов для посева следует брать бактериологической петлей или иглой.

7. Все манипуляции с чистыми культурами микроорганизмов следует проводить около пламени горелки (стерильная зона), а не в пламени по возможности быстро, но без спешки.

8. Бактериологическую петлю и иглу следует всегда держать как карандаш.

9. До и после использования петлю необходимо обжигать в пламени спиртовки, сначала на участке проволоки примыкающей к петледержателю, чтобы подсохла микробная масса, после чего петлю в вертикальном положении медленно прокаливают докрасна. Помните, что при быстром прогреве всей петли происходит разбрызгивание микробных клеток, загрязняющих воздух!

10. Использованные на занятии культуры микроорганизмов обязательно сдаются преподавателю или лаборанту.

11. Все патогенные культуры микроорганизмов необходимо регистрировать в специальном журнале.