подогрева 0,75 - 1%-ным водным раствором малахитовой зелени в течение 1 мин, промывают и высушивают. Бруцеллы из молодых культур красные, другие микробы зеленые. В более старых культурах бруцеллы красятся, в оба цвета и промежуточно.
Окраска по Ш уляку - Шину. На фиксированный мазок наливают фуксин Циля в разведении 1: 5, выдерживают 2 мин без подогревания и промывают водой; докрашивают 2%-ным водным раствором метиленовой сини 5 мин и промывают водой. Бруцеллы ярко-красные, остальные бактерии сине-голубые.
Окраска по Ганзену. Готовят растворы красок: а) 30 мл насыщенного спиртового раствора метиленовой сини смешивают со 100 мл 0,04 %-ного раствора едкого калия (его получают путем прибавления 4 мл 1%-ного водного раствора едкого кали к 96 мл дистиллированной воды); б) 0,9 г сафранина растворяют в 30 мл дистиллированной воды, полученный 3%-чый pacтвop подогревают до кипения и фильтруют через бумагу (готовят перед употреблением). Делают тонкие мазки из содержанию желудка, внутриполостных экссудатов и паренхиматозных органов абортированных плодов. Суспензии готовят в физиологическом растворе (не в дистиллированной воде!). Препараты высушивают на воздухе, можно при легком подогревании над пламенем.
|
|
даже при незначительном помутнении заменяют запасными.
Окрашивают спиртово-щелочным раствором метиленовой сини 1 мин и промывают дистиллированной водой. Докрашивают 3%-ным раствором сафранина 15-20 г, промывают и осторожно высушивают фильтровальной бумагой. Бруцеллы синие, другие бактерии и фон препарата - красные.
Окраска по Кюстеру. Высушенный препарат фиксируют над пламенем. Окрашивают щелочным раствором сафранина 1 мин и тщательно промывают. Обрабатывают 0,05%-ным раствором серной кислоты 15 г (дифференцирующая протрава) и тщательно промывают. Дополнительно окрашивают мазок 3%-ным водным раствором метиленовой сини 15-20 г и промывают. Бруцеллы красные, посторонние микробы синие.
Состав основной краски: 5 капель свежеприготовленного 3%-ного водного раствора сафранина перед употреблением смешивают с 1,5 мл нормального раствора едкого кали (5,6 г КОН на 100 мл дистиллированной воды).
Окраска по Стемпу (модифицированный метод Циля-Нильсона). Мазок фиксируют над пламенем и окрашивают фуксином Пфейфера 1О мин, слетка промывают водой и обесцвечивают 0,5%-ной уксусной кислотой 30 г. Тщательно промывают и докрашивают 1%-ным раствором метиленовой сини 20-30 с и вновь промывают. Бруцеллы красные, другие бактерии - синие.
Окраска возбудителя гемофилезнаго полисерозита свиней по Гинсу. Черную тушь разводят 1: 3 дистиллированной водой, тщательно встряхивают и центрифугируют при 3000 об/мин 15 мин. Центрифугат туши отсасывают, разливают в пробирки, стерилизуют при 1 ати 30 мин и хранят под резиновыми пробками.
|
|
На предметное стекло наносят каплю туши, суспендируют в ней петлей немного исследуемой агаровой культуры и с помощью капилляра пастеровской пипетки или шлифованного стекла делают мазок (см. Микроскопические исследования. Мазки из крови). После высушивания мазок фиксируют метиловым пли этиловым спиртом 3-5 мин, окрашивают карбол-фуксином Циля, разведенным 1: 3 дистиллированной водой, промывают и микроскопируют. Палочки и нитевидные формы микроба красные, окружены узкой светлой зоной (капсула) фон мазка темный.
Окрашивание кислотоустойчивы микробов. Эти бактерии окрашиваются карболовыми растворами фуксина и других сильных красителей. Зато их в отличие от других микробов трудно обесцветить спиртами и кислотами. На этих свойствах и основаны способы дифференциальной окраски возбудителей туберкулеза и других микобактерий позволяющие их от посторонних микробов.
Окраска по Цuлю - Нильсену. Мазок фиксируют над пламенем, накрывают полоской фильтровальной бумаги, наливают на нее карболовый фуксии Циля и нагревают с появлением паров 3-5 мин, периодически проводя стекло над пламенем, но не доводя до кипения; при этом надо доливать краску на мазок, Препарату дают остыть, удаляют бумажку, промывают водой; обесцвечивают 5%-ным раствором серной кислоты……….