Выявление специфических серологических маркёров при вирусном гепатите А и В не решило проблему диагностики острого и хронического гепатита. Всегда высказывалось предположение о наличии третьего распространённого типа вируса. Однако из-за отсутствия диагностических тестов заболевание обозначалось как гепатит ни А ни В. Недавно этот третий тип вируса был идентифици рован и назван HCV (рис. 16-29). Гепатит С, по-видимому, является самым распространённым в мире заболеванием печени. Установлено, что в мире имеется 300 млн носителей вируса, в том числе приблизительно 2,5 млн в Европе. По самым скромным подсчётам, в США острым гепатитом С ежегодно заболевают 170 тыс. человек. Из них у 70—80% инфекция персистирует и переходит в хронический гепатит [З].
В США от хронических болезней печени ежегодно умирают 8-10 тыс. больных и 1 тыс. пациентам с этим заболеванием выполняют трансплантацию печени [63].
Установлено, что посттрансфузионный гепатит ни А ни В может передаваться шимпанзе, что позволило получить от этих животных и инфицированных доноров крови образцы плазмы с высокой степенью контагиозности. Из этой плазмы экстрагирована РНК и методом обратной транскрипции получена кДНК (рис. 16-29). Затем была создана библиотека кДНК путём встраивания участков генома в плазмидный вектор и клонирования в Escherichia coli. Различные белки, экспрессированные полученными клонами, подвергали скринингу против сыворотки реконвалесцента после гепатита ни А ни В, допуская, что она содержит антитела к предполагаемому агенту ни А ни В. После тестирования миллионов клонов и 6 лет упорного труда был получен вирусспецифический клон, реагировавший с антителами в сыворотке реконвалесцента. Эта HCV-кДНК была клонирована в дрожжах; разработан серологический метод, позволявший выявлять антитела к эпитопу с100 вируса [5, 68]. Результаты были подтверждены выявлением сероконверсии у инфицированных шимпанзе и больных с естественно развившимся заболеванием [5].
|
|
HCV— вирус размером 50—60 нм, содержащий одну цепочку РНК с одной рамкой считывания и покрытый оболочкой (рис. 16-30). Он состоит из ЗОН аминокислот и 9033 нуклеотидов. HCV, вероятно, имеет отдалённое родство с семейством флавивирусов, одним из представителей которых является вирус жёлтой лихорадки [47].