Реакция связывания комплемента (РСК)

В отличие от реакций агглютинации и преципитации в РСК, кроме антигена и антитела принимает участие комплемент и гемолитическая (индикаторная) система.

Образование комплекса антиген-антитело как правило не проявляется внешними изменениями, однако при образовании такого комплекса к нему всегда присоединяется комплемент. А если комплекс антиген-антитело не образуется комплемент остается свободным. При добавлении комплекса эритроцитов барана и антител к ним (гемолизинов) свободный комплемент связывается с таким комплексом и вызывает гемолиз эритроцитов барана. При соответствии антигена и антитела с ними связывается комплемент, а чтобы убедиться в этом добавляют эритроциты барана и гемолитическую сыворотку (антитела к эритроцитам барана, гемолизины) – эритроциты гемолитической системы останутся неповрежденными и осядут на дно пробирки.

Этот принцип и положен в основу РСК.

Для постановки РСК в качестве комплемента используется свежая или лиофилизированная сыворотка морских (гвинейских) свинок, которые отличаются наиболее стабильной продукцией компонентов комплемента.

Перед постановкой основного опыта проводят титрование комплемента с целью определить дозу комплемента, которую необходимо взять в реакцию. Она должна быть такой, чтобы полностью связалась с комплексом антиген-антитело. Если часть комплемента останется не связанной, то при добавлении гемолитической системы часть эритроцитов будет лизироваться. А наличие гемолиза, как известно свидетельствует об отрицательном результате РСК.

Титром комплемента – будет его наименьшее количество, при котором наблюдается полный гемолиз.

Рабочая доза всегда будет больше чем титр на 25% и практически она будет содержаться в следующей пробирке.