Материалы и оборудование: растворы белков – яичного альбумина, молочного альбумина, лейкозина, концентрированная азотная кислота, 2н раствор NaOH, пробирки, штативы для пробирок, пипетки, резиновые груши, спиртовки, пробиркодержатели.
ХОД ОПЫТА
К 1 мл раствора белка добавляют 0,3 мл концентрированной азотной кислоты; появляется белый осадок или раствор мутнеет. Затем нагревают смесь на спиртовке до кипения и кипятят ее 1 мин; при этом раствор и осадок окрашивается в ярко-желтый цвет. При кипячении осадок может частично или полностью раствориться в результате гидролиза, но характерная желтая окраска раствора сохраняется. Охладив смесь, осторожно, по каплям, добавляют к кислой жидкости избыток (1,5 мл) 2н раствора NaOH. Выпадает осадок кислотного альбумината, образующий с избытком щелочи ярко-оранжевый раствор.
ОБЪЯСНЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ОПЫТА
Ксантопротеиновая реакция обнаруживает наличие в белке одиночных или конденсированных ароматических ядер, т. е. остатков таких аминокислот, как фенилаланин, тирозин, триптофан. Желтое окрашивание появляется в результате нитрования этих ядер азотной кислотой и образования полинитросоединений. Переход в щелочной среде желтой окраски подобных веществ в оранжевую обусловлен образованием более интенсивно окрашенных анионов. Вместо едкой щелочи можно применять водный аммиак.
|
|
Кислотные альбуминаты, образующиеся при энергичном действии кислот на белки, нерастворимы в воде и разбавленных растворах солей, но хорошо растворимы в растворах щелочей и разбавленных кислотах. Кислотные альбуминаты связывают значительно большее количество щелочи, чем исходный белок.
Чистый желатин не содержит многих аминокислот, в том числе и перечисленных выше, и не дает ксантопротеиновой реакции.
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 4
НЕКОТОРЫЕ СВОЙСТВА КАРБОНОВЫХ КИСЛОТ
ЦЕЛЬ: изучение некоторых химических и физических свойств карбоновых кислот.
МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ: муравьиная кислота, уксусная кислота, щавелевая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, молочная кислота, винная кислота, пробирки и штативы для пробирок, пипетки, резиновые груши, трубки газотоотводные, спиртовки, пробиркодержатели, весы.