Осаждение белков солями тяжелых металлов

Материалы и оборудование: растворы белков – молочного альбумина, казеина, желатина, яичного альбумина, лейкозина, 17,15% (насыщенный) раствор сульфата меди, 20% раствор ацетат свинца, пробирки, штативы для пробирок, пипетки, резиновые груши.

ХОД ОПЫТА

Материалы: белки (растворы молочного альбумина, казеина, желатина, яичного альбумина, лейкозина); сульфат меди (насыщенный водный рас­твор); ацетат свинца (20%-ный водный раствор).

Помещают в две пробирки по 1 мл исследуемого раствора белка и добавляют в одну из них раствор сульфата меди, а в дру­гую - раствор ацетата свинца. Реактив в обоих случаях вводят медленно, по каплям, при встряхивании. Первоначально образует­ся хлопьевидный осадок или раствор мутнеет вследствие выделе­ния малорастворимого соединения белка с солью меди (голубого цвета) или солью свинца (белого цвета). При дальнейшем добав­лении реактива осадок снова растворяется.

ОБЪЯСНЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ОПЫТА

Соли тяжелых металлов уже в очень малых концентрациях в растворе осаждают белки, образуя с ними нерастворимые в воде солеобразные соедине­ния. Поэтому белки являются противоядием при отравлениях солями многих тяжелых металлов, например ртути.

Осаждение белков солями тяжелых металлов необратимо. Однако некото­рые из таких осадков, в частности полученные в условиях описанного опыта растворяются в избытке осадителя - раствора соли меди, свинца или сереб­ра - в результате пептизации осадка адсорбирующимися на его частицах ионами.

БИУРЕТОВАЯ РЕАКЦИЯ БЕЛКОВ

Материалы и оборудование: растворы белков – желатина, яичного альбумина, молочного альбумина, лейкозина, 17,15% (насыщенный) раствор сульфата меди, 2н раствор NaOH, пробирки, штативы для пробирок, пипетки, резиновые груши.

ХОД ОПЫТА

К 1 - 2 мл раствора белка добавляют равный объем кон­центрированного раствора щелочи и затем 1-2 капли (не больше!) раствора сульфата меди. Жидкость окрашивается в ярко-фиолето­вый цвет.

ОБЪЯСНЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ОПЫТА

Биуретовая реакция обнаруживает наличие в молекуле бел­ка пептидных групп —СО—NН—. Продукты распада белка - полипептиды так­же дают биуретовую реакцию, причем цвет образующихся медных комплексов определяется числом аминокислот, связанных пептидной связью. Дипептиды дают синюю окраску, трипептиды - фиолетовую, а тетрапептиды и более сложные пептиды - красную.

Некоторые другие атомные группы, например —СS—NH—, —СН—NН—, при накоплении их в молекуле также могут обусловить положительную биуре­товую реакцию. При ее проведении следует избегать избытка медной соли, так как образующаяся в этом случае синяя гидроокись меди (II) маскирует появление фиолетовой окраски.