Результаты исследования и их обсуждение

Результаты исследования сведены в таблицу 1.

№	Тест	Контроль		Опыт		% к Контролю		p< (Конт-роль-опыт)
		M	m	M	m	%	d%
1	Рост (мм)	9,0	2,7	9,0	0,3	99,4	4,0	-
2	Вес (гр)	31,8	7,6	24,9	0,8	78,1	3,7	-
3	Динамометрия (гр)	97,5	14,4	144,7	12,3	148,4	2,8	0,05
4	Висение на струне (сек)	232	81	387	100	166,3	29,3	0,05
5	toC	38,0	0,3	38,3	0,3	100,9	0,2	-
6	Гиперплазия на  изопротеренол(%)	103,6	3,9	146,8	3,0	141,7	0,7	0,001
7	Бласты селезенки (млн)	2,6	0,4	5,6	0,4	215,4	2,4	0,001
8	ОВИМ	3,29	0,29	4,2	0,2	126,6	1,8	0,05
9	Тимус (мг)	15	2,6	38,3	5,1	255,3	3,6	0,001
10	Селезенка (мг)	94,8	5,7	139,5	3,4	147,2	1,0	0,001
11	Почки (мг/гр)	7,1	1,0	11,7	0,9	165,5	2,5	0,01
12	Печень (мг/гр)	39,7	0,6	52,3	3,2	131,6	1,0	0,05
13	Сердце (мг/гр)	3,6	0,3	5,0	0,1	139,9	1,4	0,01
14	ТБК (OD)	0,045	0,002	0,036	0,003	80,0	1,7	0,05
15	ЦИК(ОD)	0,338	0,010	0,290	0,015	85,9	1,0	0,05

Оценка общего вида животных по блеску, цвету и лоску шерсти, наличию старческого горба и блеску глаз в баллах не была информативная, так как старые животные выглядели не намного хуже молодых 3-х - 4-х месячных. Мы наблюдали резкие изменения внешнего вида лишь в гораздо более поздних возрастах и при кормлении животных преимущественно гранулированным кормом, добавки же, как в нашем случае, овощей, молока, круп и не ограниченное питание предотвращали резкие внешние изменения у мышей в наших наблюдениях. Рост грызунов продолжается в течение всей жизни, однако, со временем он резко замедляется; не было отмечено различий в средних показателях роста в контроле и опыте. Вес опытных мышей статистически не отличался от контроля, однако, в наших условиях, когда животные получали неограниченное и разнообразное питание, в контроле они четко разделялись на 2 группе – с массой тела 24-27 гр. и 33-40 гр., с явными признаками ожирения во втором случае. В то же время, в группе опытных животных масса тела мышей не выходила за пределы 24-27 гр. (рис.4а и 4б).

Таким образом, ТФ явно влиял на жировой обмен животных, предотвращая возрастное ожирение. Отмечалось также снижение потребления опытными животными корма – влияние ТФ на алиментарное ожирение.

 

В группе с введением ТФ не было отмечено признаков выраженного ожирения животных – все животные имели примерно одинаковую массу тела.

Типичное различие внешнего вида животных при введении ТФ и без него, а также сравнение с молодым животным, показано на фото 1. Видно, что введение ТФ предотвращает ожирение старой мыши. Таким образом, ТФ предотвращал развитие возрастного ожирения у мышей.

 

Известно, что с возрастом происходят значительные изменения обмена, а также развивается дистрофия паренхиматозных тканей, которые замещаются на соединительную ткань (возрастная дистрофия и склероз тканей) и на жировую ткань (возрастное ожирение). Известно также, что центральный механизм старения самообновляющихся тканей связан со снижением клеточного самообновления (снижением потенциала клеточного роста). Возможность влияния на старение тканей посредством влияния на процесс клеточного роста связана с хорошо разработанной отечественными учеными теорией регуляции процессов роста соматических тканей лимфоцитами, впервые наблюдаемой на моделях травматической регенерации ряда органов.

 

 

 

Фото 1.

Эффект Трансфер Фактора (ТФ) на развитие возрастного ожирения у мышей

Внизу – молодая мышь, Вверху – старая мышь, Посредине – старая мышь которой вводили ТФ.

 

Рис. 4а и 4б.

Разброс веса старых мышей в контроле (4а) и при введении ТФ (4б).

По вертикали – вес мышей в г. По горизонтали - № мыши

 

Обмен веществ, оцениваемый по температуре тела, показывал в среднем более высокие значения, но индивидуальные вариации были высоки, видимо, ввиду того, что местная температура у самок может значительно зависеть от эстрального цикла и для данного возраста неравномерного вхождения в (пре)климактерический период.    

 

Сила опытных животных, оцениваемая по динамометрии и времени висения на струне, статистически значимо возрастала, что сопровождалось и достоверным увеличением индекса икроножной мышцы (ОВИМ) – широко применяемым в экспериментальной геронтологии тестом.

 

У опытных животных также значимо увеличивалась относительная масса внутренних органов, особенно иммунокомпетентных – тимуса и селезенки. Количество активных клеток селезенки, оцениваемых по центрифугированию в градиенте плотности фиколла с пониженной плотностью, также значимо увеличивалось. Количество иммунных комплексов, с другой стороны, значимо снижалось. Известно, что с возрастом уровень иммунных комплексов у мышей значимо повышается, что отражает развитие аутоиммунных процессов.

 

У старых животных, как известно, развивается естественный иммунодефицит, хорошо наблюдаемый как резкое снижение относительной массы иммунотропных органов – тимуса и селезенки. Одновременно с возрастом резко снижаются процессы клеточного деления самообновляющихся тканей, а также объем и скорость гиперпластических реакций при различных воздействиях. Удобно для оценки степени ростового потенциала ткани использовать известный феномен Селье – фармакологически индуцированную реакцию гиперплазии ткани слюнных желез, демонстрируемую всеми грызунами. С возрастом эта реакция резко снижается, известно также, что это является результатом снижения активности лимфоидных клеток – регуляторов процессов роста соматических тканей: в ходе гиперпластических и регенеративных реакций самого разного типа происходит активирование регулирующих этот процесс лимфоидных клеток - видимо, известных как лимфоциты, реагирующие в сингенной смешанной культуре лимфоцитов [4-6]. Так как типичным для активации лимфоцитов-регуляторов клеточного роста соматических тканей является их бластная активация, то их можно выделить в градиенте фиколла с пониженной плотностью [4-6].

 

Было показано, что введение изопротеренола приводит к гиперплазии слюнных желез молодых мышей (повышение массы в 1,56-1,72 раза), тогда как все старые животные показали уменьшение реакции - снижение массы желез ниже интактных! Введение ТФ восстанавливало потенциал клеточного роста у старых мышей для всех животных – введение изопротеренола увеличило массу слюнных желез для старых животных в 1,4-1,6 раз, приближая степень гиперпластической реакции к таковой у молодых. Реакция старых мышей на изопротеренол при введении ТФ представлена на рис. 5.

 

Рис. 5.

Реакция старых мышей на изопротеренол при введении ТФ.  (по оси ординат - гиперпластическая реакция ткани слюнных желез).

 

1 – контроль

2 – контроль + изопротеренол

3 – введение ТФ

4 – введение ТФ + изопротеренол

 На рисунке показано восстановление реакции у старых мышей при введении ТФ.

 

Одновременно резко (в 2-3,5 раза) увеличивалось количество активированных клеток селезенки, имеющих более низкую плотность при центрифугировании в градиенте плотности фиколла. Также отмечалось снижение стрессовой реакции тимуса на введение адренергического агента – изопротеренола. Типичная реакция на стресс – резкое и быстрое уменьшение массы тимуса, что можно наблюдать в группе животных без введения ТФ; однако, для опытной группы животных, получавших ТФ, не отмечалось значимого снижения массы тимуса на стрессорный агент!

 

Наконец, в группе животных с ТФ снижалось количество ТБК-активных веществ крови, что указывает на благоприятное действие ТФ на процессы накопления в тканях продуктов перекисного окисления тканей с возрастом, что в соответствии со свободно-радикальной теорией старения считается одним из главных механизмов старения у млекопитающих [1,9]. 

 

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

 

Таким образом, TФ оказывал не только положительное действие на иммунные показатели старых животных, но и проявлял комплексное геропрофилактическое действие у мышей при длительном введении, влияя на: физическое состояние, силу животных, обмен веществ, свободно-радикальные механизмы старения. ТФ также восстанавливал клеточный потенциал роста тканей старых животных до уровней, близких к молодому возрасту. Обнаруженные эффекты ТФ открывают возможности нового перспективного влияния в «Медицине Антистарения».

 

ТФ, видимо, может также быть использован для активации клеточного роста при различных патологических процессах с целью заживления тканей, ран и т.д. Дополнительным интересным и перспективным является наблюдаемый эффект анти-стрессорного действия ТФ на иммунную систему и протективное действие ТФ на возрастное и алиментарное ожирение.

 

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

 

1. Анисимов В.Н. Молекулярные и физиологические механизмы старения. СПб.: Наука. - 2003.- 468с.

2. Бабаева А.Г. Прошлое, настоящее и будущее проблемы лимфоидной регуляции нелимфоидных клеток //Бюлл. экспер. биологии и мед. - 1995. - № 9. - С. 230–234.

3. Дадали В.А., Рак А.В., Столпник Е.С., Келвин В. МакКосланд, Оганова Э.А. Применение Трансфер Фактора в лечении больных остеомиелитом // Вестник Санкт-Петербургской государственной медицинской академии им. И.И. Мечникова".–          № 3–4. - 2002.

4. Донцов В.И. Регуляция лимфоцитами клеточной пролиферации - альтернатива теории “противоопухолевого надзора?”. // Иммунология. - 1989. - N. 5. - С. 94-96.

5. Донцов В.И. Иммунобиология постнатального развития. М.: Наука. - 1990. - 152 c.

6. Донцов В.И., Крутько В.Н. Подколзин А.А. Фундаментальные механизмы геропрофилактики. М.: Биоинформсервис. - 2002. - 464 c.

7. Иммунореабилитация при инфекционно-воспалительных и соматических заболеваниях с использованием трансфер факторов. Методическое письмо МЗ РФ. - 2004.

8. Карбышева Н.В., Карбышев И.А., Татаринцев П.Б., К. МакКосланд, Оганова Э.А. Трансфер-Факторы в лечении больных вирусными гепатитами. // Сибирский Журнал Гастроэнтерология и гепатология. – 2003.– №16. – С.147-149.

9. Кольтовер В.К. Свободнеорадикальная теория старения: исторический очерк // Успехи геронтологии.- 2000.-Вып.4.-С.33-40.

10. Лыкова С.Г., Немчанинова О.Б., Черникова Е.В., Гичев Ю. П. Опыт применения «Трансфер Фактора» в дерматовенерологии. // Сибирский журнал дерматологии и венерологии. – 2002. - №3. – С.34-35.

11. Оганова Э.А., Келвин В. МакКосланд.   Трансфер Факторы – природные иммунокорректоры. // В сб. науч.-практ конф. с международным участием: Иммунореабилитация при инфекционно-воспалительных заболеваниях. – Барнаул. - 29 ноября 2003. –С. 22-26.

12. Семенков В.Ф., Карандашов В.И., Ковальчук Л.В. Иммуногеронтология. М.:Медицина. - 2005. -206 с.

13. Суханов Б.П. Трансфер Факторы, как элемент питания человека. //В сб. науч. –практ. конф. с международным участием: Иммунореабилитация при инфекционно-воспалительных заболеваниях. – г. Барнаул. - 29 ноября 2003. – С. 27-28.

14. Хеннен У.Дж.   Трансфер фактор Плюс: идеальная комбинация биологически активных веществ для оптимального иммунитета (под ред. Ю. П. Гичева и               Э.А. Огановой). – Новосибирск. – 2001. – 73 с.

15. Lawrence H. S., Borkowsky W. «Transfer Factor current, status and future prospects» - Biotherapy. –1996. – Vol.9. – P.1-3.

16. Warner, H. R., Ingram, D., Miller, R. A., Nadon, N. L., and Richardson, A.G.
Program for testing biological interventions to promote healthy aging.
//Mech. Ageing Dev. - 2000. - Vol.115. - P.199-208.

 

II. Влияние Трансфер фактора™  («4 Life Research C^o.» США) на показатели биологического возраста мужчин

 

Введение.

 

Долгое время считалось, что на здоровье населения в первую очередь образ жизни (50-53%), затем биология (генетика) человека (18-25%), а уж потом окружающая среда (18-20%) и здравоохранение (7-12%) [2, 5, 7, 16, 20]. Во второй половине 1990-х годов появились и другие оценки, согласно которым возрастает роль качества среды обитания и формировании индивидуального и популяционного здоровья людей. По мнению В.В.Худолея и И.В.Мизгарева, здоровье россиян на 20-40% зависит от качества среды, а в случае сохранения существующих тенденций загрязнения окружающей среды через 30-40 лет это соотношение возрастет до 50-70% [32].

 

При этом показатели здоровья и продолжительности жизни как интегральные характеристики отражают влияние всех перечисленных факторов. По динамике изменения этих показателей можно судить об эффективности принимаемых решений, а также о перспективах развития общества. Отсюда становится понятной значимость системы слежения за здоровьем человека с одновременным поиском решений, способных снизить негативные влияния со стороны окружающей среды.

 

Важным условием эффективности мониторинга является подбор информационных массивов с учетом их адекватности и достоверности.

Принимая во внимание различную подверженность отдельных контингентов влиянию негативных факторов окружающей среды, следует тщательно формировать изучаемые группы населения с учетом их возрастного статуса.

 

В последние 15 лет в России наблюдается ухудшение практически всех демографических показателей. Специалисты говорят о депопуляции, то есть практически о вымирании населения нашей страны. Причинами преждевременного старения и даже смерти могут являться патологии в тех или иных органах и системах, появляющиеся под влиянием негативных антропогенных факторов окружающей среды. Однако действие антропогенных факторов, как правило, не является непосредственной причиной тех или иных заболеваний; оно может снижать сопротивляемость организма и проявляться ранними расстройствами различных систем, приводя в дальнейшем к патологическим проявлениям.

 

Усиление неблагоприятного воздействия условий жизни и отрицательных факторов окружающей среды оказывается огромное влияние на иммунологическую реактивность людей. Многие исследователи отмечают, что у жителей крупных городов наблюдается высокая степень распространения экологически зависимых вторичных иммунодефицитов [12]. Не компенсируемые изменения в иммунной системе приводят к истощению резервных возможностей, развитию патологий, нарушению процессов регенерации и к связанным с ними процессам старения.

 

Отсюда становится понятной актуальность поиска средств и методов, направленных на нормализацию работоспособности иммунной системы. Данная работа посвящена изучению влияния нового, перспективного иммуномодулятора (трансфер фактора) на показатели биологического возраста человека.

С этой целью были поставлены следующие задачи:

- оценить степень функционального напряжения систем организма испытуемых;

- выявить эффективность влияния трансфер фактора, как на отдельные биомаркеры старения организма, так и на показатели биологического возраста в целом;

- определить влияние трансфер фактора на показатели активности функциональных систем организма человека.

 

Компьютерная система «Диагностика старения: Биовозраст», разработанная Национальным Геронтологическим Центром (Москва), и программно-аппаратный комплекс «Диакомс», позволяют реализовать принцип динамического контроля за эффективностью влияния трансфер фактора на состояние здоровья организма человека. Это создает предпосылки для разработки рекомендаций по его использованию у людей со сниженными функциональными возможностями иммунной системы. В этом и заключается практическая значимость настоящей работы.

 

Новизна проведенного исследования определяется тем, что впервые было предложено использование трансфер фактора, как мощного, естественного иммуномодулятора в профилактике преждевременного старения организма человека.

I. Обзор литературы.