Буферный глицерино-солевой

 

Состав: Натрий хлорид (NaCl) - 4,2 г
  Калий гидрофосфат - 3,1 г
  Калий дигидрофосфат - 1,0 г
  Глицерин нейтральный - 300 мл
  Вода дистиллированная - 700 мл

 

Приготовление: ингредиенты растворяют, перемешивают, смесь разливают в стерильные пробирки по 5 мл и автоклавируют при 112°C 30 минут. Рекомендуется с целью контроля в процессе хранения раствор слабо подкрашивать феноловым красным.

 

Изотонический раствор хлорида натрия

 

Состав: Натрий хлорид (NaCl) - 8,5 г
  Вода дистиллированная - 1000 мл

 

Приготовление: соль растворяют при подогревании, фильтруют, разливают в пробирки по 5-7 мл, стерилизуют при 121°C 30 минут.

 

3.2. Среды обогащения*(8)

 

Селенитовая среда

 

Состав: Натрий гидроселенит  без примеси теллура - 4 г
  Пептон венгерский "Рихтер" или чехословацкий "Спофа" - 5 г
  Натрий гидрофосфат, безводный - 7 г
  Натрий дигидрофосфат, безводный - 2 г
  Лактоза - 4 г
  Вода дистиллированная - 1000 мл

 

Приготовление: среду готовят из двух основных растворов.

Раствор I. Определяют пропорцию  и  используемым образцом пептона и гидроселенита натрия для установления pH в пределах 6,9-7,1, с этой целью регулируют соотношение фосфатов. Подтитровка нужна всегда при изменении серии любого из входящих в среду основных ингредиентов. После установления соотношения фосфатов к раствору I добавляют пептон и лактозу. Разливают во флаконы по 50 мл и стерилизуют текучим паром два дня по 30 минут. Количество фосфатов в рецепте среды дано в расчете на безводные препараты. При отсутствии таковых заранее заготовленные навески "выветривают" в термостате в течение 15-16 суток.

Раствор II. 10% раствор гидроселенита натрия готовят на стерильной дистиллированной воде перед употреблением. Перед началом работы в каждый флакон с 50 мл основного раствора (I) добавляют 2 мл раствора гидроселенита натрия (раствора II), асептически разливают по 5-7 мл в стерильные пробирки и закрывают плотно пробками. Дальнейшая стерилизация не требуется.

Основной раствор (I) для среды можно хранить в холодильнике 1-2 месяца. Для приготовления среды следует использовать высококачественный пептон ("Рихтер", "Спофа" или жидкий аминопептид - отечественный заменитель импортного пептона).

 


Понравилась статья? Добавь ее в закладку (CTRL+D) и не забудь поделиться с друзьями:  



double arrow
Сейчас читают про: