2020-06-29
82
Вирусы размнож-ся только в жив клетках. Культив-е вируса происходит на уровне орг-ма подопытного жив-го и на уровне культуры клеток (вне орг-ма). Вирусы имеют тканевую и типовую специф-ть. Поэтому при выдел-и неизвестного вируса одномоментно заражают 3-4 культуры клеток. Чаще используют эмбрион ткани (кур/эмбрион). Вирусы оспы хорошо размнож-ся в хорион-аллантоисной оболочке, паротита – в амнионе, гриппа – в амнионе и аллантоисе, бешенства – в желточном мешке. Берут 12-дневн эмбрионы.
При невозмож-ти выделить и идентиф-ть вирус стандартными методами (на культуре клеток, кур/эмбрионах) инфекц материал вводят лаборат жив-м (мыши, кролики, обезьяны), после развития инфекц процесса проводят повторное зараж-е чувствит клеточных культур. Методы типирования вирусов:
микроскопич – вирусоскопия, обнаруж-е внутриклет включ-й;
иммуновирусологич – метод иммунной электронной микроскопии, иммунофлюоресценции, гемагглютинации, гемадсорбции.
Идентиф-я вирусов – иммуновирусологич методы, включают - РТГА, задержки гемадсорбции, РСК, РН, преципитации в геле агара.
|
|
|
Серологич р-и:
· РН – основана на подавл-и цитопатогенного эффекта после смешив-я вируса со специфичными АТ. Неизвест вирус смеш-ют с известной антисыв-кой и вносят в монослой клеток. Если клетки погибли, то вирус соответ-ет антисыв-ке.
· РТГА – прим-ют для идентиф-и вирусов, способных агглютинировать эритроциты.
· Прямая иммунофлюоресценция – метод быстрый. Заражённые клетки светятся.
· Иммуноэлектронная микроскопия – сложный и дорогой метод. Определяют разл виды вирусов.
Выявл-е противовирусных АТ в сыв-ке: РТГА, РСК, РИФ, ИФМ.
Выявл-е вирусных Аг: ИФМ, гибридизация ДНК, ПЦР (полимеразно-цепная р-я).
Особ-ти противовирусного иммунитета. Роль фагоцитоза и гумор факторов. Интерфероны, св-ва, класс-я. Особ-ти д-я интерферонов на вирусы.
Осн мех-мы защиты направлены на огран-е и подавл-е вир/репродукции в клетках (при антибактер иммунитете – разруш-е возбуд-ля). Неспецифич факторы противовир иммунитета:
· клет ареактивность – нет клеток, способных поддерживать репродукцию вирусов;
· термолаб вируснейтрализующие β-ингибиторы – ЛП сыв-ки крови, способные связывать вирус. Комплекс непрочный, распад-ся через 2 часа под д-ем трипсина, но сопровожд-ся необратимой инактивацией вируса;
· t° тела – при ↑ t° - задержка и подавл-е репродукции вируса;
· фагоцитир-е - вирусы слабо фагоцитир-ся и не разруш-ся ферментами. Но макрофаги фагоцитируют клетки, поражённые вирусом;
· интерференция вирусов – 1 вирус подавляет репродукцию другого в клетке-хозяине. Но не всегда!
· интерферон – ингибитор репродукции вирусов. Это гликопротеин: α, β, γ, I типа и II типа. Нарушает трансляцию вирусной РНК рибосомами клетки-хозяина и прекращает синтез белка.
|
|
|
Специфич факторы: АТ – представлены Ig. Т-клетки лизируют клетки-мишени, инфициров вирусами; распознают чужерод вирусный Аг в комплексе с молекулой МНС I на мембране клетки-мишени. Цитотоксич эффект Т-киллеров регулир-ся белками–перфоринами (наруш-е осмотич баланса с внеклет средой приводит к гибели клетки). Т-хелперы – распознают Аг в комплексе с молекулой МНС II; стимулируют дифференц-ку В-клеток и Т-киллеров; активируют макрофаги.
Мех-м противовир д-я интерферона: интерферон индуц-ет «антивирус состояние» клетки – резистент-ть к проникн-ю или блокада репродукции вирусов. Блокада обусловлена угнет-ем трансляции вирусной м-РНК. Интерфероны не обладают вирусспецифичностью (широк спектр антивирус активности). Интерфероны препятствуют репродукции вирусов за счёт активации клет/ферментов – протеинкиназ. Интерферон-I подавляет синтез вир/белков. Интерферон-II ингибирует размнож-е вирусов, активирует Т-клетки, моноциты, макрофаги, блокирует «раздевание» вирусов.
ВИРУСОЛОГИЯ ЧАСТНАЯ
Вирусы-возбуд-ли ОРЗ. Класс-я. Общая хар-ка ортомиксовирусов. Стр-ра вириона гриппа. Особ-ти генома и реализации информ-и. Репликация вирионной РНК.
Самые распростр инфекц б-ни чел-ка. Широкому распростр-ю способствуют: возд-кап путь зараж-я, большое разнообразие возбуд-лей, отсутствие стойкого иммунитета. Различают:
· Вирусы гриппа (ортомиксовирусы) – А,В,С. Наиболее опасен вирус гриппа А.
· Вирусы парагриппа (парамиксовирусы) – выделены 5 типов, поражает верхние отделы дых путей.
· Вирусы эпидемич паротита (парамиксовирус) – поражает околоушные слюнные железы.
· Вирус кори (парамиксовирус) – интоксикация, сыпь, пораж-е дых путей.
· Респираторно-синцитиальный вирус (парамиксовирус) – поражает дых пути у новорожд-х.
· Респираторные коронавирусы – поражают дых пути и жкт.
· Аденовирусы – клиника, как у гриппа.
· Вирус краснухи (тогавирусы) – лихорадка, сыпь, ↑ л/узлов, уродства плода у берем-х.
· Риновирусы – клиника гриппа.
Вирусы гриппа – овальные «одетые» вирусы, 80-120 нм, вирионы неправ формы. Геном образован 1-нитчатой молекулой РНК, состоит из 8 сегментов. Нуклеокапсид организован по типу спиральной симметрии. Суперкапсид образован 2 слоями липидов, кот-е пронизывают гликопротеиновые шипы, определяют гемагглютинирующую или нейраминидазную активность. Гемагглютинин способ-ет проникн-ю вирусов в клетки путём слияния с мембраной клетки. Нейраминидаза распознаёт и взаимод-ет с рецепторами. 7 сегментов генома кодируют структурные белки, 8-й – неструктурные, кот-е сущ-ют только в инфициров клетках. Основные белки: матриксный (М-белок – защ ф-я – окружает геном); нуклеопротеидный (NP – регуляторная и структурная ф-и). Репликация первично реализ-ся в цитоплазме инфициров клетки, синтез вирусной РНК происходит в ядре.
