В итоге белки распределяются по М.М. и могут быть собраны в виде отдельных хроматографических фракций

Рисунок 17 – Распределение молекул среди гранул сефадекса

Рисунок 18 – Распределение веществ, различающихся по молекулярной массе

Хроматография по сродству (афинная хроматография) основана на принципе избирательного связывания белков со специфическими веществами (лигандами), прикрепленными к носителю. Лиганд (глюкоза) ковалентно присоединяют к носителю (иммобилизуют), после чего наносят на колонку исследуемую белковую смесь. Несвязавшиеся с глюкозой белки удаляют соответствующим буфером, а нужный белок элюируют раствором, содержащим лиганд в очень высокой концентрации. При этом присоединенные к колонке остатки глюкозы в молекуле белка замещаются на глюкозу, находящуюся в растворе