Антигены хламидий

- родоспецифический (общий для всех видов хламидий) – липополисахарид;

- видоспецифический (различен для всех видов хламидий) – белки;

- типоспецифический (различен для сероваров С. trachomatis) – белки.

Диагностика При културальном исследовании на хламидии перед взятием материала больные не должны принимать в течение месяца антибиотики тетрациклинового ряда.

Достаточно информативным является исследование у мужчин осадка первой порции утренней мочи методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Забор материала у девочек производится со слизистой оболочки преддверия влагалища. Объектом исследования на наличие хламидий могут быть смывы со слизистой оболочки глаз, носоглотки, слюна, мокрота.

Материал распределяется на предметном стекле, высушивается на воздухе и фиксируется в метаноле или холодном ацетоне. Окрашивается по Романовскому – Гимзе. Цитоплазма окрашивается в голубой цвет, ядра в фиолетово-синий.

Иммунологические методы основаны на обнаружении антигенов хламидий в эпителии и других тканях путем обработки препаратов специфическими антителами.

Метод прямой иммунофлюоресценции предусматривает прямое выявление антигенов хламидий. При люминесцентной микроскопии включения хламидий определяются в виде зеленой или желто-зеленой флюоресценции включений на фоне коричнево-оранжевом фоне цитоплазмы клеток.

Непрямой методиммунофлюоресценции применяют в тех случаях, когда нет в наличии ФИТЦ-коньюгата антихламидийных антител.

Методы иммуноферментного анализа основаны на обнаружении растворимого антигена хламидий в исследуемых пробах.

Выявление в сыворотке крови антител к липополисахаридному антигену хламидий классов IgG, IgA, IgM с определением их титра позволяет определить стадию заболевания.

2. Микробиология дифтерии. Морфология, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства возбудителей. Токсигенность, свойства токсина и методы его выявления. Схема лабораторной диагностики. Специфическая профилактика и терапия.

Corynebacterium diphtheriae – гр+ палочки, прямые или слегка изогнутые, могут располагаться в виде коротких цепочек или иметь конфигурацию V или Y. Не образуют спор и не имеют жгутиков. В цитоплазме с помощью специальных методов окраски (по Нейсеру) можно выявить метахроматические зерна валютина, расположенных в бактериальной клетке на периферии, что придает им форму булавы.

Аэробы и факультативные анаэробы. Требуют культивирования на сложных питательных средах, содержащих продукты гидролиза белков с добавлением сыворотки или крови. На кровяных теллуритовых средах через 28-72 часа роста образуются колонии S -типа – гладкие, диаметром 1-2мм; S - R колонии обычно выпуклые, приподнятым центром, диаметром -3мм.

Pод Corynebacterium виды diphtheriae, ulcerans, pseudotberculosis, xerosis. C. diphtheriae подразделяется на 4 культурально-биохимические варианты – gravis, mitis, intermedius, belfanti.

Классическая дифтерия – острое инфекционное заболевание, при котором наблюдается локальное фибринозное дифтеритическое воспаление зева, сопровождающееся тяжелой интоксикацией, которая преимущественно дает клинические проявления, связанные с поражением сердца и периферических нервов. Однако у привитых детей и взрослых наблюдаются локализованные формы: дифтерия носа и, редко, других локализаций (глаз, ушей, кожи, половых органов).

Единственный источник болезни – человек (больной, реконвалесцент, носитель). Основной механизм передачи инфекции – воздушно-капельный, иногда контактный (через предметы и пищу). Инкубационный период обычно составляет 2 – 5 дней. Возбудитель выделяется во внешнюю среду из организма больного или носителя со слюной, пленками, сохраняя жизнеспособность в течение нескольких дней на посуде, игрушках и других предметах. Хорошо переносит высушивание (до 5 мес. сохраняется в пыли). Чувствителен к дезинфицирующим веществам.

Коринебактерии каталазоположительны и ферментируют углеводы с образованием молочной кислоты, не разлагают мочевину, редуцируют нитраты. Патогенность C. diphtheriae для человека связана с токсигенностью – способностью вырабатывать экзотоксин, что приводит к развитию дифтерии.

Основной фактор вирулентности – дифтерийный экзотоксин состоящий из двух полипептидных фрагментов А и В, связанных дисульфидным мостиком. Фрагмент В обеспечивает связывание молекулы токсина с поверхностными рецепторами чувствительных эпителиальных клеток, что позволяет фрагменту А, обладающему АДФ-рибозил-трансферазой активностью проникать внутрь клетки, где он блокирует синтез белка клетки (фрагмент А катализирует необратимую инактивацию факторов элонгации 2, которых необходим для продвижения растущей пептидной цепи на рибосомах).

Материал для исследования – мазок (смыв) из зева, носа и других пораженных участков. Взятие материала из зева и носа проводят сухим тампоном и доставляют в лабораторию в течение 3 часов. Засевают на кровяной теллуритовый агар, хинозольную среду Бучина и коринебактагар с 5% крови. Инкубируют чашки при 37 оС. Изучают колонии через 24 часа. Подозрительные колонии на кровяно-теллуритовой среде через 24 ч – светло-серого цвета, выпуклые с ровными краями, вязкие; через 48 ч – серые с металлическим оттенком, ровными краями, вязкие или крошащиеся; на среде Бучина – синий цвет (оттенки от серовато-зеленого до фиолетового), а среда в месте их роста имеет фиолетовый оттенок. Из сомнительных колоний готовят препарат для микроскопии и окрашивают его по методу Нейссера.

Токсигенные свойства определяют с помощью теста Элека, основанного на процессе встречной иммунодиффузии токсина (антигена) и антитоксичных антител в плотной питательно среде.

Индикация дифтерийного токсина в исследуемом материале и в чистых культурах проводится в РНГА или в ИФА. Для индикации tox -гена используют ПЦР.

Заболевание оставляет антитоксический иммунитет, но у 6 – 7% переболевших могут возникнуть повторные заболевания дифтерией. Восприимчивость к дифтерии зависит от содержания антитоксина в крови. Тест для оценки иммунитета – реакция Шика – реакция нейтрализации токсина антитоксина антитоксическими антителами in vivo. Лица с отрицательной реакцией Шика обладают иммунитетом.

Специфическая профилактика и лечение. Адсорбированный дифтерийный анатоксин моно- и в составе АКДС, АДС-М по плану или экстренно по контакту. Возбудители дифтерии чувствительны к эритромицину, Этиотропное лечение осуществляется антитоксической сывороткой.