Техника. Препарат фиксируют жидкостью Карнуа в течение 10-30 мин, промывают 80%-ным спиртом и проводят через нисходящие концентрации спиртов. Реакция проявляется только в гидролизованном материале. Последовательность гидролиза: препарат помещают на 2-3 мин в 1 N pаствор соляной кислоты при комнатной температуре, затем на 5-6 мин в 1 N pаствор соляной кислоты, нагретой до 60°С, и снова в первый раствор на 1-2 мин, затем помещают в реактив Шиффа на 2-3 ч. Реактив Шиффа готовят следующим образом: 0,5 г основного фуксина растворяют в 90 мл кипящей дистиллированной воды, охлаждают до 50°С, фильтруют и прибавляют 3 мл концентрированной соляной кислоты. Отдельно в 10 мл холодной воды растворяют 2 г безводного или 4 г кристаллического сульфата натрия. Полученный раствор сульфата приливают к раствору фуксина, охлажденному до 25°С.
Второй способ приготовления раствора Шиффа: 1 г основного фуксина для фуксинсернистой кислоты растворяют в 200 мл кипящей дистиллированной воды, охлаждают до 50°С, фильтруют и добавляют 20 мл 1 N cоляной кислоты, охлаждают до 25°С и добавляют 1 г метабисульфита натрия или калия. Реактив хранят на холоду в широкой склянке с притертой пробкой. Реактив считается пригодным, пока он сохраняет запах сернистого газа и цвет бледного чая (розовая окраска является цветом непригодности).
Препарат промывают по 15-20 мин в трех порциях сернистых вод и затем в дистиллированной воде. Способ приготовления сернистых вод: 1) к 200 мл дистиллированной воды добавляют 4 мл концентрированной соляной кислоты; отдельно в 25 мл дистиллированной воды растворяют 4 г безводного или 8 г кристаллического сульфата натрия, приливают этот раствор к подкисленной воде, взбалтывают и дают отстояться или 2) 0,5 г метабисульфита натрия или кали, 5 мл 1н. соляной кислоты помещают в колбу и доводят объем раствора до 100 мл дистиллированной водой. Для получения более контрастных препаратов их докрашивают 0,1-0,25%-ным раствором, лучше слабо подкисленным, светло-зеленого или водного голубого (вассерблау). Препарат промывают водой, высушивают, проводят через ряд спиртов восходящей концентрации до абсолютного, ксилол и помещают в бальзам.
Микроскопическая картина. Ядерные элементы окрашиваются в красно-фиолетовый цвет, протоплазма при докрашивании приобретает зеленый оттенок. Лучше всего окрашиваются конидии несовершенных грибов.