Негативная окраска по Бурри

Используется для выявления амеб и их цист.

Техника. См. выше.

Микроскопическая картина. На темно-сером тушевом фоне видны бесцветные клетки и цисты (рис.24).

Микроскопическое исследование актиномицетов

Простые методы окраски (см. выше)

Техника. См. выше.

Микроскопическая картина. Клетки приобретают цвет примененного красителя (рис.25).

Метод Грама

Техника. См. выше.

Микроскопическая картина. Клетки окрашиваются грамположительно (в сине-фиолетовый цвет).

Микроскопическое исследование патогенных грибов

Исследуемый материал помещают на предметное стекло в каплю 10-20% едкой щелочи (или смеси спирта с глицерином), закрывают покровным стеклом и исследуют сразу после приго­товления и через 20 минут (рис.26).

Основные красители

Наиболее часто применяемые в микологической практике красители для контрастного окрашивания мицелия – метиленовый синий, метиловый фиолетовый, генциановый фиолетовый, раствор Люголя.

Метиленовый синий применяют в виде спиртовых, водных, щелочных растворов: 1) спиртовый раствор: к 100 мл 96%-ного спирта добавляют 3 г краски, взбалтывают, оставляют отсто­яться на несколько суток, фильтруют; перед употреблением разводят в 5-10 раз; раствор прочный; 2) водный раствор: к 100 мл воды добавляют 2 г краски, отстаивают 2 суток; перио­дически взбалтывают.

Окраска метиленовым синим

Техника. На зафиксированный мазок наносят водно-спиртовый раствор метиленового синего на 5-10 мин.

Микроскопическая картина. Клетки окрашиваются в синий цвет (рис.27)

Дифференциальное окрашивание мицелия

Техника. Готовят смесь Судана 3, хлопчатобумажного синего и йода в молочной кислоте (1:1:1).

Микроскопическая картина. В гифах жир окрашивается в ярко-оранжевый цвет, гликоген – в буро-красный, а прото­плазма – в синий.

Окрашивание амилоидной оболочки

Применяют для большин­ства сумчатых и несовершенных грибов.

Техника. Краси­тель – раствор Люголя. Несколько капель раствора добавляют к готовому препарату на предметное стекло. Время окрашивания от нескольких секунд до 1 часа.

Микроскопическая картина. Амилоидные оболочки окраши­ваются в синий цвет.

Окрашивание клеточной оболочки

Метод Пешкова

Применяют для дрожжей и низших грибов.

Техника. Препарат фикси­руют в жидкости Карнуа и опускают на 2-5 мин в 10%-ный рас­твор танина, тщательно промывают и красят фуксином Пфейффера в течение 30-60 секунд, не промывая микроскопируют.

Микроскопическая картина. Оболочки ок­рашиваются в синеватые цвета.