К занятию:
1. Кратко законспектировать теоретические данные по лабораторной работе.
Во время занятия:
2. Описать этапы работы.
3. Описать результаты.
4. Сделать выводы.
Лабораторная работа № 9
Тема: | Обмен углеводов |
Цель работы: | Изучение регуляторного воздействия важнейших метаболитов клетки (АТР, АМР и цитрата) на интенсивность гликолиза в мышечной ткани |
Оборудование и материалы:
· спектрофотометр SOLAR; · кюветы полистирольные; · термостат; · центрифуга UNIVERSAL 30RF; · весы центрифужные; · пробирки центрифужные; · гомогенизатор; · пипетки стеклянные на 1 мл и 5 мл; | · микропипетки автоматические; · цилиндры мерные на 250 мл и 100 мл; · пробирки стеклянные химические; · штативы для пробирок; · бумага фильтровальная; · марля; · ножницы; · палочки стеклянные. |
Реактивы:
· мышечная ткань крысы;
· NaCl, 0,9% раствор;
· никотинамид;
· фосфатно-солевая буферная смесь (ФСБС):
1% раствор Na2HPO4, 0,44% раствор NaCl, 0,03% раствор KCl, 0,02% раствор MgSO4×7H2O;
· глюкоза, 0,02 М раствор в ФСБС;
· АТР, 0,06 М, 0,6 М растворы в ФСБС;
· АМР, 0,6 М раствор в ФСБС;
· цитрат Na, 0,3М раствор в ФСБС;
· цитрат Na /АМР, 0,6 М/0,3 М раствор в ФСБС;
· сульфат цинка 7-водный (ZnSO4×7H2O), 5% раствор;
· гидроксид натрия (NaOH), 0,3 М раствор;
· серная кислота (H2SO4), конц.;
· смесь*: сульфат меди (II) (CuSO4), ортофосфорная кислота (H3PO4);
· П -оксидифенил, 1,5% раствор в диметилформамиде (HCON[CH3]2);
· молочная кислота, стандартный раствор, 2,5 ммоль/л;
· трихлоруксусная кислота (ТХУ), 5% раствор;
· рабочий реагент для глюкозооксидазного метода (смесь ферментов: глюкозооксидазы и пероксидазы);
· глюкоза, стандартные растворы 5,55 ммоль/л и 16,67 ммоль/л;
· вода дистиллированная.
Теоретическая часть