Оои сибирская ЯЗВА

СИБИРСКАЯ ЯЗВА – АНТРАКС - о страя инфекционная болезнь животных и людей. Заражение при контакте, при ранениях, укусах насекомых, алиментарно, аэрогенно. Характеризуется признаками септицемии, интоксикации. Условно различают 3 формы с.я.: кожная – образование отёков и карбункулов (нарывов с чёрным центром), кишечная и лёгочная (в этих случаях очаги воспаления образуются в кишечнике или лёгких, быстро возникает септицемия, что ведёт к гибели.) Наиболее восприимчивы к с.язве к.р.с., м.р.с., верблюды, дикие травоядные, лошади. У свиней чаще атипичная форма в виде ангины, плотоядные малочувствит.

КЛАССИФИКАЦИЯ: семейство Bacillaceae,род Bacillus,

· вид Bacillus anthracis

Факторы вирулентности: образование капсулы и экзотоксина.

Методы диагностики:

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД.

Материал для исследования: Вскрывать трупы при подозрении на сибирскую язву запрещено: опасность распространения спорообразующего возбудителя во внешней среде!!

1.При жизни у больного животного–берут капли крови из уха в виде 10-12 толстых мазков на предм.стёклах;высушить,сложить мазками внутрь между спичек,уложить в банку,укупорить,сделать надпись«Мазок нефиксирован!»

2. От трупа – ухо, отрезанное с той стороны, на которой лежит труп; пред-варительно его туго перевязывают у основания в 2-х местах, подкладывают снизу поддон, отрезают между лигатурами, место отреза прижигают; ухо заворачивают в слегка увлажнённую дезинфектантом ткань и помещают в герметичную тару. + мазки крови из надреза уха.

3. От трупов и туш свиней – участки отёчной соединительной ткани гортани, миндалин, заглоточные и подчелюстные лимфоузлы.

4. При подозрении на с.я. в ходе вскрытия трупа – вскрытие прекращают, берут для исслед. кусочки селезёнки, печени, изменённые лимфоузлы, кровь.

Посуду с материалом помещ. во влагонепрониц. тару, опечатывают, отпр. в лабораторию с нарочным с сопроводительным документом. + звонок. В лаборатории такой материал исследуют вне очереди, любой степени свежести.

Микроскопия: Окраска по Граму, на капсулу по Ребигеру и на спору. Морфология Bacillus anthracisзависит от материала, из которого деланы мазки.

1. В мазках из крови и свежего пат.материала – крупные Гр+ палочки в виде коротких цепочек, по 2-3. Концы клеток, обращенные в цепочке друг к другу как бы «обрублены», а снаружи – закруглены. Имеется КАПСУЛА, общая для всей цепочки. Неподвижные.

2. В пат.мат. от свиней или несвежем – форма клеток часто атипичная: Гр+ палочки, толстые, изогнутые, зернистые, со вздутиями, +«тени микробов».

3. В молодой к-ре с МПА или МПБ–длинные, переплетающиеся цепочки из крупных Гр+ палочек, иногда утолщен. на концах и напомин. «бамбуковую трость».

4. В старых культурах при доступе О₂ образуются округлые эндоспоры, затем вегетативные части микробных клеток отмирают, остаются споры.

Культуральные свойства: B.anthracis – факультативный анаэроб, t оптимум 35-36^оС, неприхотливый к питательн.средам, время роста 18-24 ч.

На МПБ – среда прозрачная, на дне осадок в виде «комочка ваты».

На МПА – крупные,матовые серо-белые колонии в R-форме с локонообразным, бахромчатым краем; под малым увелич. микроскопа характеризуются как «голова Медузы»,«львиная грива». На кровяном агаре гемолиза нет.

Для выявления способности образовывать капсулы – посев на специальные кровяные среды типа среды ГКИ. На них образ. гладкие колонии в S-форме + капсула.

Биохимические свойства. Арабиноза+, ксилоза+, гидролиз желатина (рост в виде «перевёрнутой ёлочки»), лецитиназа-, уреаза+;

Тест «феномен жемчужного ожерелья» (+). Для этого - посев на пенициллиновый агар. На вырезанные кусочки такого агара, помещенные на предметные стёкла в чашках Петри, делают посев 3-х часовой испытуемой бульонной культуры. Через 1-3 часа прямо на поверхность агаровой пластинки с посевом помещают покровное стекло и препарат изучают под микроскопом.Чувствит. к пенициллину клетки B.anthracis принимают форму шара (образуя сферопласты), цепочки имеют вид «ожерелья».

Фосфатазная активность (-). Тест на фосфатазную активность: посев на среду с фенолфталеин-фосфатом (ФФФ-ага р). После получения колоний на этой среде под крышку вносят каплю нашатырного cпирта. Фосфатазаположительные колонии розовеют, а колонии B.anthracis остаются белыми.

БИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД (B.anthracis вирулентна, антракоиды–нет)

Одновременно с посевом материала на пит.среды суспензию исслед. материала в физ. растворе вводят 2-м белым мышам п/к в спину(0,2-0,5 мл)или морским свинкам п/к в живот(0,5-1,0 мл),гибель через 1-3 суток от септицемии. Наблюдение за живыми до10 сут. Так же проводят заражение выделенной культурой возбудителя.

Фагодиагностика: используются фаги К-ВИЭВ, Гамма МВА. При нанесении специфического фага на зону посева культуры–отсутствие роста.

СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД:

1. Прямой МФА и ИФА для исследования материала из очага поражения.

2. РДискП с полученной чистой культурой для её идентификации.

3. РП по Асколи для исследования кож.сырья и пат.материала (ухо).

Если материал несвежий, культуру возбудителя сибирской язвы бывает выделить невозможно из-за произошедшего лизиса микроорганизмов. В этом случае также применяют РП по Асколи.

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ МЕТОД: ПЦР – обнаружение генов, кодирующих синтез токсина и капсулы.

АЛЛЕРГИЧЕСКИЙ МЕТОД: Применяется только у людей: аллерген – антраксин п/к в предплечье (как реакция Манту). У больных, переболевших и привитых – зона воспаления > 15 мм.

БИОПРЕПАРАТЫ:

1. Живая вакцина из бескапсульного эталонного штамма СТИ.

2. Живая вакцина из штамма 55.

3. Вакцина ГНКИ.

4. Ассоциированная живая жидкая вакцина против сибирской язвы и эмкара КРС.

Гипериммунная лечебно-профилактическая сыворотка и гамма-глобулин.

Диагностические биопрепараты: преципитирующая сыворотка и стандартный Аг для РП, люминесцирующие сыворотки для МФА, диагностические бактериофаги.