Б) проба Ниландера

Принцип метода:

Реакции основаны на восстановительных свойствах глюкозы, которая в щелочной среде при нагревании, окисляясь, восстанавливает металл (в пробе Фелинга до Сu₂О - красный цвет, в пробе Ниландера до свободного Bi - черный цвет).

Химизм реакции Фелинга:

С₆Н₁₂О₆ + 2CuSO₄ + 5 КОН ^t® С₅Н₁₁СООК +2 К₂SO₄ + Н₂О +CuOH ↓

Глюкоза (желтый осадок)

¯

Н₂О+Cu₂O ↓

(красный осадок)

Химизм реакции Ниландера:

3 С₆Н₁₂О₆ +2 Bi(OH)₂NО₃ + 5 КОН ^t® 3 С₅Н₁₁СООК +2 Bi¯ + 2 КNО₃ + 6 Н₂О

Глюкоза (черный цвет)

ХОД РАБОТЫ

Проба Фелинга:

К I мл исследуемой мочи приливают 0,5 мл реактива Фелинга, нагревают пробирку до кипения. В случае положительной реакции на глюкозу наблюдается красное окрашивание вследствие образования оксида меди (Сu₂O).

Проба Ниландера

К I мл исследуемого раствора (мочи) приливают 0,5 мл реактива Ниландера, нагревают пробирку до кипения и кипятят 2 минуты, в случае положительной реакции на глюкозу наблюдается выпадение черного осадка, вследствие образования свободного Bi.

Количественное определение глюкозы в моче с помощью тест-полосок «Глюкотест», «Глюкофан».

Принцип метода:

Определение основано на специфической энзиматической реакции с использованием ферментов глюкозоксидазы и пероксидазы. Окисление глюкозы атмосферным кислородом катализируется ферментом глюкозооксидазой. При этом образуется глюконолактон и Н₂О₂. Пероксид водорода в последующей реакции, катализируемой ферментом пероксидазой, окисляет хромогенную систему с образованием интенсивно окрашенных продуктов реакции.

Тест реагирует появлением интенсивного красно-коричневого окрашивания на концентрацию глюкозы 2 ммоль/л и выше. Концентрация 1,7 ммоль/л в первой утренней порции мочи принята за верхний предел физиологической глюкозурии. Тест специфичен для глюкозы.

Оценка теста: тест считается положительным при изменении цвета реактивной зоны. В зависимости от концентрации глюкозы в пробе исходная желтая окраска реактивной зоны меняется на красновато-коричневую или коричнево-красную. Отдельные зоны окраски соответствуют следующим концентрациям: менее 2, 6, 17, 56, более 170 ммоль/л.

ХОД РАБОТЫ

Полоску бумаги «Глюкофан» погружают в исследуемую мочу, затем высушивают на воздухе и через минуту сравнивают окраску индикаторной зоны с цветной шкалой.