Определение группы крови по стандартным сывороткам

Дляопределения групповой принадлежности крови необходимо следующее оснащение: два комплекта стандартных гемаплютинирующих сывороток I (0), II (А), III (В) групп двух различных серий и одна ампула сыворотки IV (АВ) (в каждую ампулу с сыворот­кой опускают сухую чистую пипетку), флакон с изотоническим раствором хлорида натрия с пипеткой, чисто вымытая сухая тарелка, предметные стекла, стерильные копьевидные иглы для прокола мякоти пальца, стерильные марлевые шарики, спирт. Определение проводят в помещении с хорошим освещением, при температуре от 15 до 25 *С

Каждая ампула стандартной сыворотки должна иметь паспорт-этикетку с указа­нием группы крови, номера серии, титра, срока годности, места изготовления. Ам­пулой без этикетки пользоваться запрещается. Стандартные сыворотки для опреде­ления группы крови по системе АВО выпускают с определенной цветовой маркиров­кой: I (0) - бесцветная, II (А) - голубая, II I (В) - красная, IV (АВ) - желтая. Маркировка имеется на этикетке в виде цветных полос: на этикетке сыворотки I (0) полос нет, сыворотки И (А) — две полосы синего цвета, сыворотки III (В) — три поло­сы красного цвета и сыворотки IV (АВ) — четыре полосы желтого цвета. Сыворотки хранят при температуре 4—10 °С. Сыворотка должна быть светлой и прозрачной, ам­пула — сохранной. Наличие хлопьев, осадка, помутнение являются признаками не­пригодности сыворотки. Титр сыворотки должен быть не менее 1:32, активность — высокая: первые признаки агглютинации должны появляться не позднее чем через 30 с. Сыворотки с истекшим сроком хранения к использованию непригодны.

Тарелку делят цветным карандашом на 4 квадрата и в направлении по часовой стрелке обозначают квадраты I (0), II (А), III (В). В соответствующий квадрат тарел­ки пипеткой наносят крупную каплю сыворотки двух серий I (0), 11 (А), Ш (В) групп. Подушечку пальца обрабатывают спиртом и делают прокол кожи иглой-копьем. Пер­вую каплю крови снимают марлевым шариком, последующие капли разными угол­ками предметного стекла вносят последовательно в капли сыворотки и тщательно размешивают. Капля вносимой крови должна быть в 5—10 раз меньше капли сыво­ротки. Затем путем покачивания тарелки тщательно перемешивают кровь с сыворот­кой. Предварительные результаты оценивают через 3 мин, после чего добавляют кап­лю изотонического раствора хлорида натрия, вновь смешивают путем покачивания тарелки и через 5 мин проводят окончательную оценку реакции агглютинации (рис. 37, см. цв. вкл.).

При положительной реакции изогемагглютинации хлопья и зернышки из скле­ившихся эритроцитов не расходятся при добавлении изотонического раствора хло­рида натрия и перемешивании. При отрицательной реакции капли сыворотки на та­релке прозрачные, равномерно розового цвета, не содержат хлопьев и зерен. Возмож­ны следующие 4 комбинации реакций агглютинации со стандартными сыворотками I (0), II (А), III (В) групп.

1. Все 3 сыворотки в обеих сериях не дают агглютинации. Исследуемая кровь —

I (0) группы.

2. Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой П (А) группы обеих серий и положительная с сыворотками I (0) и III (В) групп. Исследуемая кровь —

II (А) группы.

3. Реакция изогемагглютинации отрицательная с сывороткой III (В) группы в обеих сериях и положительная с сывороткой I (0) и Jp (А) групп. Исследуемая кровь —

III (В) группы.

4. Сыворотки I (0), II (А), III (В) групп дают положительную реакцию в обеих се­риях. Кровь принадлежит к IV (АВ) группе. Но прежде чем дать такое заключение, необходимо провести реакцию изогемагглютинации со стандартной сывороткой IV (АВ) группы по той же методике. Отрицательная реакция изогемагглютинации по­зволяет окончательно отнести исследуемую кровь к IV (АВ) группе.

Выявление других комбинаций свидетельствует о неправильном определении груп­повой принадлежности крови больного.