Выделение производных 1,4 –бенздиазепина из биологического материала

25 г измельченного биологического материала (средняя проба) из 100 грамм каждого органа, помещают в круглодонные колбы с притертой пробкой ёмкостью 250 мл вносят по 50 мл 6н раствора соляной кислоты и гидролизуют на глицериновой бане с обратным холодильником при 125-135 °С в течение часа. По окончании гидролиза холодильник промывают 5 мл 2 н раствора соляной кислоты и промывные воды присоединяют к гидролизату. Горячий гидролизат фильтруют через ватмановский фильтр (белая лента). Остаток на фильтре трижды промывают 2 н раствором соляной кислоты и добавляют гранулированный гидроксид натрия, не допуская при этом сильного разогревания гидролизата. Устанавливают реакцию среды 6-8 по универсальному индикатору (при значении рН выше 9 образуется стойкая эмульсия). Гидролизат экстрагируют смесью хлорформа и изопропилового спирта 8:2 трижды (по 25, 15 и 15 мл) в течение 5 минут каждой порцией. Полученные экстракты соединяют, фильтруют через слой безводного сулфата натрия (1,5 г). Объем экстракта доводят в мерной колбе до 50 мл (V ₁) и используют для обнаружения и количественного определения.