2015-06-28
861
Цель занятия: научиться готовить временные ацетокарминовые препараты и определять фазы митоза.
Материалы и оборудование: 1. Зафиксированные корешки лука. 2. Микроскоп. 3. Ацетокармин. 4. Препаровальная игла. 5. 45%-ная уксусная кислота. 6. Предметные и покровные стекла. 7. Фильтровальная бумага. 8. Спиртовки и спички. 9.Учебные плакаты.
Содержание занятия
Преподаватель знакомит студентов с типами деления клеток, фазами и стадиями деления митоза, фиксаторами и красителями, используемыми для приготовления временных препаратов.
Митоз – сложный тип деления, протекающий в соматических клетках и являющийся основным способом их размножения. В результате митоза из одной материнской клетки образуется две дочерние. Ядро каждой дочерней клетки имеет, как правило, такой же набор хромосом, какой был в исходной материнской клетке.
Удобнее всего просматривать фазы митоза и подсчитать число хромосом в клетках молодых корешков. Корешки должны быть длиной не более 1-2 см с хорошо выраженной меристемой зоны деление клеток. Корешки фиксируют в измененном фиксаторе Карнуа (3:1) и хранят в 70%-ном спирте.
Порядок выполнения
1. На дно фарфоровой чашечки налить раствор ацетокармина и перенести в него корешки лука.
2. С целью лучшего окрашивания объекта и одновременного мацерирования раствор ацетокармина с корешками нагревать над пламенем спиртовки до появления паров.
3. Краситель слить из чашки и корешки 2-3 раза промыть 45%-ной уксусной кислотой. При слабом окрашивании можно уксусной кислотой не промывать.
4. На предметное стекло нанести каплю 45%-ной уксусной кислоты и поместить в нее окрашенный корешок.
5. Лезвием бритвы отделить кончик корешка (конус нарастания) и накрыть его покровным стеклом.
6. Кончиком спички или деревянной палочки легкими ударами по покровному стеклу осторожно раздавить препарат и распределить клетки равномерно в один слой. Покровное стекло не должно смещаться. Избыток уксусной кислоты удалить фильтровальной бумагой.
7. Приготовленный препарат поместить на предметный столик микроскопа и найти хорошие метафазные пластинки.
8. Идентифицировать все фазы митоза.
9. Зарисовать строение клетки в каждой из фаз митоза, рисунок сверить с препаратом и плакатами.
Вопросы для самопроверки
1. Какой длины должны быть корешки лука для изучения фаз митоза?
2. Что входит в состав фиксатора Карнуа?
3. Как приготовить ацетокармин?
4. Техника приготовления временных ацетокарминовых препаратов.
5. Назовите фазы митоза.
6. Что такое метафазная пластинка?
