Б) Применяемые реактивы

Реактив Несслера: 20 г KJ растворяют в 50 мл дистиллированной воды и добавляют до насыщения (около 32 г) небольшими порциями AgJ₂; затем приливают 460 мл воды и вносят 134 г КОН. Отстоявшуюся жидкость сливают в темную склянку.

Приготовление парадиметиламидобензальдегида. 4 г парадиметиламидобензальдегида растворяют в 30 мл 96%-го этилового спирта и добавляют 80 мл концентрированной соляной кислоты.

Е. Определение ферментов бактерий.

А) Определение липазы

Посев исследуемой культуры выполняют глубинным методом в желточно-солевой агар или штрихом по его поверхности. Термостатируют при 37°С несколько суток. Вокруг жирорасщепляющих колоний появляется непрозрачная зона солей жирных кислот.

Поскольку жиры не смешиваются с водой, для приготовления сред используют твины - эфиры жирных кислот и сорбита. Твины 40, 60 и 80 содержат соответственно пальмитиновую, стеариновую и олеиновую кислоты. Состав среды в г/л: твин - 10 г, пептон - 10 г, NaCl - 5 г, CaCl₂*Н₂О - 0,1 г, агар - 20 г, pH 7,4. Водный раствор твина стерилизуют отдельно при 0,5 атм., а остальную среду - при 1,0 атм. Среду разливают в чашки Петри и после ее застывания материал высевают на поверхность штрихом или уколом. Посевы выдерживают в термостате при оптимальном для данного микроба режиме. На наличие липазы указывает образование вокруг колонии или штриха непрозрачной зоны кальциевых солей жирных кислот, освобожденных из твина.

Б) Определение каталазы.

На поверхность колонии микроба, выращенного на плотной питательной среде, наносят каплю 1-3%-го раствора перекиси водорода и прикрывают стерильным покровным стеклом. При наличии каталазы появляются пузырьки газа (атомарный кислород), которые хорошо видны под стеклом.

Ж. Выявление способности бактерий восстанавливать