После подсушивания мазок фиксируют метиловым спиртом или смесью спирта с эфиром и окрашивают по Романовскому или азурэозином по Максимову. Эти красители окрашивают оксифильные элементы клетки в красный цвет, а базофильные – в различные оттенки синего и фиолетового. Рассматривают препарат с иммерсионной системой.
Основную массу клеток на препарате составляют маленькие округлые безъядерные клетки – эритроциты. Диаметр эритроцита равен 7–8 μ. В 1 мм3крови человека имеется около 5 млн. эритроцитов. Эритроциты, или красные кровяные клетки, содержат многодыхательного пигмента – гемоглобина; он обусловливает их оксифилию, вследствие чего они окрашиваются кислым красителем эозином в красный цвет. Краевая зона клетки окрашена обычно более интенсивно, чем центральная, потому что клетка имеет двояковогнутую форму и центральная часть ее более тонкая. Иногда встречаются эритроциты с неровными краями, имеющие вид тутовых ягод. Это – результат некоторой деформации клетки в связи с неправильными подсушиванием или фиксацией мазка (Леонова, 2013).
|
|
Медленно передвигая препарат, следует найти различные формы белых кровяных клеток – лейкоцитов. Они резко отличаются от эритроцитов тем, что содержат ядра. Количество лейкоцитов значительно меньше (6-7 тыс. в 13 крови), чем эритроцитов, и потому обнаружить их труднее. Чаще всего встречаются специальные или нейтрофильные, лейкоциты (65-70%от числа всех лейкоцитов). Оксифильная цитоплазма нейтрофила окрашена эозином в розовый цвет и заполнена мелкими зернами, окрашенными как кислым красителем (эозином), так и основным (азуром II) в промежуточный бледно-фиолетовый цвет. Ядро фиолетовое, состоит из нескольких сегментов, связанных между собой тонкими перемычками. Сегменты по форме различны – круглые, овальные или неправильной формы сизрезанными краями. Количество сегментов в разных клетках также различно (обычно их 4 или 5). Число сегментов увеличивается в зависимости от возраста клетки. В нормальной крови человека иногда видны – незрелые нейтрофилы –палочкоядерные. Ядра их имеют вид несегментированных палочек, изогнутых в форме подковы или буквы S (Леонова, 2013). Нейтрофилы несколько крупнее эритроцитов (диаметр их около 9 μ). Они обладают способностью к активному передвижению. При септическом воспалении нейтрофилы выходят в соединительную ткань и фагоцитируют бактерии. И. И. Мечников назвал их микрофагами.
Крайне сложно определить эозинофилы, так как количество этих клеток весьма незначительно (2–4%). Диаметр клетки около 10–12 μ. Вся цитоплазма сплошь заполнена оксифильными крупными зернами, окрашенными эозином в ярко-красный цвет. Цитоплазма бледно-голубая, так как слабо базофильна. Ядро бледно-фиолетовое, обычно состоит из двух–трех сегментов; перемычки между сегментами часто плохо заметны.
|
|
Обе описанные формы составляют группу зернистых лейкоцитов, ккоторой относятся также базофильные лейкоциты (базофилы). Но найти базофилы на обычном кровяном мазке очень трудно, так как их имеется от 0 до 1%, поэтому для изучения этих клеток ниже описывается специальныйпрепарат – мазок лейкемической крови, где базофилов много и они более доступны для наблюдения.
Другую группу лейкоцитов составляют незернистые лейкоциты, или агранулоциты. На мазке в сравнительно большом количестве (до 25%) встречаются лимфоциты. Малые лимфоциты – небольшие округлые клетки диаметром около 7 μ имеют большое плотное круглое ядро, окрашенное в темно-фиолетовый цвет, и узкий ободок базофильной голубой цитоплазмы. Средние лимфоциты несколько крупнее, с более широким слоем цитоплазмы, также окрашены в голубой цвет.
Большие лимфоциты отличаются от малых и средних большой величиной (до 12 μ). Ядро их имеет шаровидную или бобовидную форму и содержит меньше хроматина. Поэтому оно несколько светлее, чем ядра малых и средних лимфоцитов, и в нем можно различить одно или два ядрышка. Цитоплазма больших лимфоцитов бледно-голубого цвета, она слабо базофильна. Вокруг ядра цитоплазма образует довольно широкую каемку.
Моноциты. Это клетки различной величины (до 15 μ), но обычно самые крупные клетки крови (Леонова, 2013).
Цитоплазма серо-голубого цвета образует значительно более широкий ободок вокруг ядра, чем у лимфоцитов; ядро круглое, вытянутое или бобовидное, окрашено менее интенсивно, чем ядра лимфоцитов. Количество этих клеток сравнительно невелико (около 5-8%).
Наряду с клетками на препарате можно увидеть кровяные пластинки. Они представляют собой небольшие (2-3 μ, в диаметре) протоплазматические тельца неправильной формы. В центре пластинок лежат мелкие базофильные зернышки, окрашивающиеся в фиолетовый цвет. Кровяные пластинки часто слипаются и образуют скопления, которые располагаются между эритроцитами.
3 исследуемых мазка имели нормальные показатели состава крови, нарушений в структуре кровяных телец обнаружено не было.