Экспериментальный препарат «изолированное сердце»

Крысы массой 200-250 г наркотизируются (золетил 50 мг/кг) на фоне внутрибрюшинного введения гепарина (500 МЕ). Сердце извлекается путем торакотомии. Вскрытие грудной клетки производят, начиная с удаления кожно-мышечного покрова передней стенки грудной клетки, после чего выделяют надгрудинную кость, пересекают хрящи истинных ребер примерно на середине расстояния между грудиной и костной частью каждого ребра, а затем пересекают ребра вблизи реберно-позвоночных суставов. В результате вскрытия грудной клетки по этому способу грудина остается связанной с седьмыми ребрами, боковые же стенки грудной клетки, а также частично передние и задние ее стенки подлежат удалению. Затем иссекается перикард и обнажается сердце. Его захватывают большим и указательным пальцами левой руки за основание и осторожно оттягивают вниз, чтобы перерезать аорту (и магистральные сосуды) на расстоянии, достаточном для последующего канюлирования. Выделенное сердце помещается в чашку Петри с охлажденным до состояния частичного оледенения раствором КХ, где выделяется аорта, а сердце очищается от соединительной ткани. Время, потраченное на эти манипуляции должно быть минимальным, чтобы как можно быстрее обеспечить полноценную перфузию и восстановление сократительной активности сердца.

Далее аорта размещается при помощи двух пинцетов на канюле, предварительно заполненную перфузионным раствором во избежание попадания воздуха в аорту. На данном этапе важно не повредить митральный клапан, который в течение всей перфузии должен быть закрыт, чтобы перфузионный раствор попадал исключительно в коронарные артерии, а не в левый желудочек. Для этого важно оставить аорту достаточной длины. Для первичной фиксации используется прямая клемма для кровеносных сосудов с нарезкой. Закрепление аорты на канюле с помощью клеммы обеспечивает свободу манипуляций с лигатурой без опасности того, что сердце соскользнет с канюли во время ее подвязывания. После закрепления аорты лигатурой, клемма аккуратно снимается, и производится ретроградная перфузия сердца. После подачи перфузата сердце должно начать автономно сокращаться. В течение 5-7 минут после начала перфузии сердце отмывается от крови, устанавливаются стабильные показатели амплитуды и частоты сокращений.

Хирургические инструменты, необходимые для приготовления препарата изолированное сердце, представлены на рисунке 2.

Рисунок 2 - Набор хирургических инструментов для приготовления препарирования сердца крысы: 1– ножницы вертикально-изогнутые тупоконечные; 2 – ножницы глазные вертикально-изогнутые остроконечные; 3 – пинцет глазной фиксационный, 4 – пинцет анатомический; 5 – клемма для кровеносных сосудов детская прямая

Большой анатомический пинцет необходим для захвата кожно-мышечного покрова при торакотомии. Прямыми тупоконечными ножницами производится отрезание кожного лоскута, иссечение грудных мышц и вскрытие грудной клетки, иссечение перикарда, перерезание аорты и магистральных сосудов. При дальнейших манипуляциях используются глазные ножницы и два малых глазных пинцета. Глазными ножницами очищают сердце от остатков соединительной ткани. Глазные пинцеты используются при выделении аорты и при расположении ее на канюле. С помощью сосудистой клеммы аорту фиксируют на канюле и накладывают лигатуру. В том случае, если при выполнении вышеописанных процедур не было повреждено целостности компонентов проводящей системы сердца, оно в течение 5-7 минут полностью восстановит ритм сокращений и будет поддерживать его при соблюдении всех необходимых условий перфузии на протяжении примерно двух часов.