Приготовление растворов для перфузии сердца

Одним из основных условий работы изолированного сердца являетсяпостоянная перфузия коронарных сосудов раствором Кребса-Хенселейта (КХ). Данный раствор чаще других используется для перфузии изолированного сердца теплокровных животных среди растворов другого состава, таких как Рингера, Рингера-Локка, Тироде. Стандартный состав раствора КХ представлен в таблице 1. Состав перфузионного раствора соответствует ионному составу, а кислотность - нормальному значению кислотности крови крысы (7,36). Необходимый уровень pH обеспечивается путем добавления гидрокарбоната натрия на последнем этапе приготовления раствора.

Таблица 1.

Состав раствора Кребса-Хенселейта

Некоторые из перечисленных в таблице 1 солей могут храниться в растворенном виде при температуре 4°С в закрытой колбе в течение месяца без снижения качества приготовляемых из них рабочих перфузионных растворов. Поэтому в целях снижения временных затрат и приближения условий проведения эксперимента к максимально одинаковым обычно готовится раствор десятикратной концентрации (стоковый раствор «10Х») в соответствии с таблицей 2. В тех же условиях может храниться водный раствор соды (5,6%).

Таблица 2.

Приготовление концентрированного стокового раствора (10X) для раствора Кребса-Хенселейта

Непосредственно перед проведением эксперимента стоковый раствор доводится до необходимого объема с добавлением к нему компонентов в соответствии с таблицей 3 (из расчета на 1 л). Заключительным этапом приготовления рабочего раствора является добавление соды для приведения значения pH к оптимальному. Для этого изменяют исходный pH раствора при помощи pH-метра (pH-150МИ, Измерительная техника). Затем на каждый литр рабочего раствора добавляют 7 мл водного раствора соды (5,6%), после чего снова измеряют pH раствора. При необходимости концентрацию соды в рабочем растворе увеличивают, повторяя процедуру. Следует учитывать, что при оксигенации раствора его pH снижается в среднем на 0,2 единицы. Важно оценить кислотность оксигенированного нагретого раствора, взятого из перфузионной колбы перед началом эксперимента.

Таблица 3.

Приготовление перфузионного раствора Кребса-Хенселейта

Если в целях эксперимента существует необходимость оценки влияния тех или иных химических соединений на работу изолированного сердца, то готовят перфузионный раствор с добавлением исследуемого вещества в заданной концентрации.