Опыт №2. Реакции обнаружения ацетона

1. Реакция образования йодоформа. 1 мл исследуемого раствора прибавляют 1 мл 10% раствора аммония гидроксида и по каплям 1% раствор йода в 2% растворе калия йодида до сохранения слабо-желтого окрашивания. Выделяется желтый осадок йодоформа с характерным запахом и характерной формой кристаллов при рассмотрении под микроскопом.

Напишите уравнение реакции

2. Реакция с натрия нитропруссидом. К 1 мл исследуемого раствора прибавляют 1 мл 10% раствора натра едкого и 5 капель 1% свежеприготовленного раствора натрия нитропруссида. Появляется оранжево-красное окрашивание. Затем к смеси прибавляют 1 мл кислоты уксусной (до кислой реакции среды). Появляется красно-фиолетовое окрашивание или вишнево-красное окрашивание.

Напишите уравнение реакции

 

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА №14

Изолированиеуксусной кислоты из биологического объекта методом дистилляции. Качественное определение токсиканта.

Цель: на практике познакомиться с изолированием летучих веществ методом перегонки с водяным паром. Овладеть методами качественного определения кислоты уксусной.

Опыт №1

     Установление целостности упаковки, определение консервирования, цвета, запаха, наличия инородных включений и массы (объема)

Биологического материала.

Проводят осмотр упаковки биологического материала. Необходимо удостовериться в ее целостности. Изучают надписи на этикетке. Упаковку аккуратно вскрывают, не допуская попадания ее частей в биологический материал. Устанавливают наличие консервирования объекта. Отмечают запах: естественный (запах печени, мочи, почек и т.д.), специфические, посторонние запахи: (запах аммиака, сероводорода, уксусной кислоты, горького миндаля и т.д.). Определяют цвет биологического объекта. Устанавливают наличие инородных включений.

Если на исследование поступил твердый биологический материал, необходимо измерить его массу на технических весах. Если поступил жидкий биологический объект, устанавливают его объем мерным цилиндром.

Опыт №2

     Определение рН биологического объекта.

Для определения рН среды небольшое количество объекта измельчают, вносят в пробирку, добавляют дистиллированную воду и хорошо взбалтывают, фильтруют. Определяют рН среды водной вытяжки: стеклянной палочкой наносят каплю вытяжки на красную и синюю лакмусовые бумажки или универсальный индикатор. Параллельно ставят контрольный опыт с дистиллированной водой. Покраснение синей лакмусовой бумажки свидетельствует о кислой реакции среды. Посинение красной лакмусовой бумажки свидетельствует о щелочной реакции среды. Щелочная среда водных вытяжек может быть обусловлена наличием в объекте едких щелочей, карбонатов щелочных металлов, аммиака и других соединений. Для решения вопроса о наличии едкой или карбонатной щелочи в объекте проводят дополнительные исследования: при добавлении к 1мл водного извлечения капли спиртового раствора фенолфталеина наблюдается розовое или красное окрашивание. К окрашенной жидкости при взбалтывании добавляют 3-5 капель 10%-ного раствора хлорида бария. При наличии в водном извлечении едкой щелочи окраска фенолфталеина не исчезает, а в случае наличия карбонатов щелочных металлов – окраска исчезает, и появляется белый осадок карбоната бария.

Опыт №3

     Определение свежести биоматериала. 

Часть объекта помещают в коническую колбу (объемом 50мл), отверстие колбы закрывают пробкой, под которую прикрепляют 3 бумажки: смоченную водой красную лакмусовую бумажку; бумажку, смоченную раствором ацетата свинца; бумажку, смоченную раствором сульфата меди. Если в исследуемом объекте содержится аммиак, то лакмусовая бумажка и бумажка, смоченная сульфатом меди, синеют, последняя – за счет образования аммиаката меди. Если в исследуемом объекте присутствует сероводород, бумажка, смоченная щелочным раствором ацетата свинца, чернеет.

Наличие в исследуемом объекте аммиака и сероводорода свидетельствует о процессах гниения и поэтому сделать заключение, что аммиак поступил извне, нельзя.

Опыт №4

Изолирование уксусной кислоты из биологического материала методом дистилляции.

Внимательно рассмотрите подготовленный аппарат для проведения дистилляции, проверьте его герметичность. Зарисуйте схематично аппарат в лабораторную тетрадь.

Биологический материал в количестве 100г взвешивают на технических весах для определения точной массы, измельчают, помещают в круглодонную колбу на 500 мл. БО смешивают с дистиллированной водой до густоты кашицы. Колбу с объектом исследования закрепляют в штативе и погружают в холодную водяную баню. Когда в парообразователе пойдет пар, объект подкисляют минеральной кислотой (серная или фосфорная) до рН =2, соединяют все части прибора и доводят водяную баню до кипения, чтобы уменьшить конденсацию водяного пара вы колбе. Объект не подкисляют заранее.

Ввиду высокой летучести уксусной кислоты при перегонке с водяным паром ее собирают в сосуд, содержащий 0,1М раствор натра едкого.

После окончания дистилляции сначала отсоединяют от парообразователя колбу с биоматериалом и только потом прекращают нагревать парообразователь и водяную баню.

Дистилляция должна проводиться по возможности медленно, что достигается регулированием пламени горелок.

Опыт №5

Качественное определение кислоты уксусной в дистилляте.

Реакция с железа хлоридом (III)

К 2-3 мл дистиллята прибавляют 1 каплю 10% свежеприготовленного раствора хлорида железа (III). Появление красной (или оранжевой) окраски указывает на наличие ацетат-иона в дистилляте.

Получение этилацетата

В фарфоровую чашку вносят 3-5 мл дистиллята и выпаривают досуха на водяной бане. К сухому остатку прибавляют 1 мл спирта этилового и 2 мл кислоты серной концентрированной, а затем смесь осторожно нагревают в пламени спиртовки. При наличии ацетатов в дистилляте появляется специфический запах этилацетата.

 

Заполните  «Журнал регистрации вещественных доказательств и документов к ним»».