Группы | Гиперкапническая гипоксия | Гемическая гипоксия | ||
ЛПА, сек. (М ± m) | % | Время жизни, сек. (М ± m) | % | |
Контроль | 1220±32,59 | 1811±37,86 | ||
Фенибут | 1721±37,28*# | 141% | 2669±37,57** | 147,4% |
Пирацетам | 1645±36,86* | 134% | 2522±36,92** | 139,3% |
Фенотропил | 1811±36,80**# | 148% | 2856±37,58**# | 157,7% |
РГПУ-195 | 1739±37,66*# | 142,5% | 2786±36,65**# | 153,8% |
РГПУ-197 | 1838±37,87**# | 150,7% | 2903±36,13**# | 160,3% |
РГПУ-201 | 1848±37,55**# | 157,5% | 2885±36,10**# | 159,3% |
n=8 | n=8 |
Обозначения: ЛПА – латентный период наступления апноэ у животных в условиях нормобарической гипоксии с гиперкапнией; Время жизни – время выживания животных в условиях гемической гипоксии на фоне метгемоглобинобразования.
* - p<0,05, ** - p<0.01 – достоверность различий по сравнению с контрольной группой животных (непараметрический U-критерий Манна-Уитни; ранговый однофакторный анализ Крускала-Уоллиса, критерий Данна для множественных сравнений).
и достоверно превосходили препараты сравнения пирацетам и фенибут, и недостоверно – фенотропил.
Соединения РГПУ-195 и РГПУ-201 в условиях генерализованных клонико-тонических судорог, вызванных введением пикротоксина и коразола, оказали нейропротекторный эффект, что проявлялось в достоверном увеличении латентного периода до развития судорог, уменьшении длительности и выраженности тонической и клонической фаз судорог, а также их общей продолжительности, снижении числа летальных исходов в группе. Поскольку оба использованных конвульсанта проявляют антагонистическое взаимодействие с ГАМКА-рецепторами, данные эффекты соединений можно объяснить возможным ГАМКА-миметическим действием.
|
|
Соединения РГПУ-195, РГПУ-197 и РГПУ-201 оказывали выраженное нейропротекторное действие в условиях острого эмоционально-болевого стресса, 48-часовой депривации парадоксальной фазы сна, а также острого гипергравитационного стресса препятствуя развитию нарушений
Таблица 2.
Влияние соединений на двигательную и ориентировочно-исследовательскую активность стрессированных среднеактивных животных в тесте «отрытое поле» (ОП) и степень тревожности в тесте «приподнятый крестообразный лабиринт» (ПКЛ) (значения показателей M±m).
Группы | «открытое поле» | «приподнятый крестообразный лабиринт» | ||
ГДА | СОИА | ВСО | ВТО | |
Интактные | 34,21±2,15 | 11,54±0,85 | 46.71±1.24 | 127.12±2.35 |
Стрессированные | 17,24±0,25** | 4,38±0,64** | 9.78±0.25** | 167.34±2.15** |
Пирацетам | 19,88±1,18**# | 5.16.57**# | 16.14±0.53**# | 154.25±1.47**# |
Фенибут | 24.21±1.58*# | 6.75±0.63*# | 26.35±0.84**## | 147.54±1.25*# |
Фенотропил | 28.42±1.18*## | 7.88±0.34*## | 32.24±1.11*## | 142.25±1.42## |
РГПУ-195 | 32.48±1.46## | 10.57±0.49## | 43.51±1.46## | 133.24±1.47## |
РГПУ-197 | 30.27±0.42## | 8.79±0.62*## | 40.57±1.18## | 136.54±2.34## |
РГПУ-201 | 28.87±1.06## | 9.47±0.78## | 41.68±1.57## | 134.87±2.36## |
n=7 |
Обозначения: в тесте ОП - ГДА – горизонтальная двигательная активность (число пересеченных квадратов); СОИА – суммарная ориентировочно-исследовательская активность (сумма количества вертикальных стоек и заглядываний в отверстия); в тесте ПКЛ - ВСО – время в светлом отсеке (сек.); ВТО – время в темном отсеке (сек.).
|
|
* - p<0,05;** - p<0,01 - – достоверность различий по сравнению с группой интактных животных (непараметрическийU-критерий Манна-Уитни).
# - p<0,05;## - p<0,01 - – достоверность различий по сравнению с группой стрессированных животных (непараметрическийU-критерий Манна-Уитни).
психоневрологического статуса у животных в постстрессорном периоде (угнетение локомоторной и ориентировочно-исследовательской активности в «открытом поле», повышение тревожно-фобических реакций в «приподнятом крестообразном лабиринте» (Таблица 2), нарушение памяти в тестах «условная реакция пассивного избегания» и «тесте экстраполяционного избавления» (Таблица 3)) и уменьшая степень их выраженности. По нейропротекторному действию данные соединения превосходили пирацетам, фенибут и фенотропил. Наибольшей нейропротекторной активностью в условиях стресса различного генеза обладало соединение РГПУ-195.
Таблица 3.
Влияние соединений на состояние памяти стрессированных среднеактивных животных в тестах «условная реакция пассивного избегания» (УРПИ) и «тест экстраполяционного избавления» (ТЭИ).
Группы | Воспроизведение УРПИ | Воспроизведение ТЭИ | ||||
ЛПЗ (M±m) | n/N | % | ЛПП (M±m) | n/N | % | |
Интактные | 173.45±19.38 | 0/7 | 0 | 21.32±1.08 | 0/7 | 0 |
Стрессированные | 88.36±5.62** | 5/7 | 71,4** | 96.31±2.15** | 6/7 | 85.7** |
Пирацетам | 121.32±10.65**# | 4/7 | 51.7**# | 68.52±1.35**# | 5/7 | 71.4** |
Фенибут | 139.37±10.24*# | 3/7 | 42.85**# | 51.64±1.48*# | 4/7 | 51.7**# |
Фенотропил | 151.85±10.52*## | 2/7 | 28.57**## | 42.54±1.65## | 3/7 | 42.85**# |
РГПУ-195 | 167.53±11.24## | 2/7 | 28.57**## | 31.14±1.22## | 3/7 | 42.85**# |
РГПУ-197 | 159.11±11.28## | 2/7 | 28.57**## | 35.28±1.56## | 3/7 | 42.85**# |
РГПУ-201 | 160.32±11.54## | 2/7 | 28.57**## | 33.17±1.51## | 3/7 | 42.85**# |
n=7 |
Обозначения: в тесте УРПИ - ЛП – латентный период первого захода в темный отсек (сек); в тесте ТЭИ - ЛПП – латентный период подныривания (сек.). n/N-количество животных в группе посетивших темный отсек в тесте УРПИ или не решивших экстраполяционную задачу в тесте ТЭИ (n) из общего числа животных в группе (N); % - процент животных в группе, посетивших темный отсек в тесте УРПИ или не решивших задачу в тесте ТЭИ.
* - p<0,05;** - p<0,01 - – достоверность различий по сравнению с группой интактных животных (непараметрическийU-критерий Манна-Уитни; критерий χ2).
# - p<0,05;## - p<0,01 - – достоверность различий по сравнению с группой стрессированных животных (непараметрическийU-критерий Манна-Уитни; критерий χ2).
При морфологическом изучении (морфометрический метод определения степени поражения центральной нервной системы по Чубинидзе А.И., 1972) нейропротекторное действие РГПУ-195 было более значимым по сравнению с фенотропилом и выражалось в статистически достоверном уменьшении гиперхромных, гидропически измененных нейронов в следующих образованиях головного мозга: гиппокамп, гипоталамические ядра, амигдалярный комплекс, таламическая область (передние отделы), ядерные образования вентрального отдела продолговатого мозга.
Проведенный in vivo нейрофармакологический анализ взаимодействия соединений РГПУ-195 и РГПУ-201 с основными нейромедиаторными системами головного мозга показал, соединения РГПУ-195 и РГПУ-201 вероятно, обладают дофаминомиметическим, Н-холиномиметическим, ГАМКА-миметическим и серотониномиметическим механизмом действия. Помимо этого, выявлено отсутствие взаимодействия с центральными адренергическими рецепторами, М-холинорецепторами у данных соединений. Таким образом, выявленные компоненты механизма действия соединений с достаточно высокой вероятностью объясняют наличие у них антидепрессантной активности за счет усиления дофамин- и серотонинергической нейропередачи, поскольку в основе патогенеза депрессий лежит снижение активности данных систем. Взаимодействие соединений РГПУ-195 и РГПУ-201 с серотонин- и дофаминергической системами объясняет также протективное влияние данных соединений на эмоциональный статус животных в условиях различной психопатологии. Выявленные в результате проведенного исследования ноотропные и нейропротекторные свойства данных соединений могут быть обусловлены влиянием на холинергическую и ГАМК-ергическую нейротрансмиссию, участие которых в процессах памяти, адаптогенеза, нейропротекции является доказанным научным фактом.
|
|
Таким образом, проведенные исследования выявили несколько перспективных для дальнейшего изучения соединений, обладающих оригинальным спектром фармакологической нейропсихотропной активности. Полученные данные обосновывают целесообразность разработки выделенных соединений в качестве потенциального ноотропа с анксиоседативным действием (РГПУ-195), ноотропа с анксиоактивирующим и антидепрессантным действием (РГПУ-197) и антидепрессанта с анксиоседативным и ноотропным действием (РГПУ-201).
ВЫВОДЫ
1. Новые производные ГАМК и ГК оказывают ноотропное действие (РГПУ-195, РГПУ-197 и РГПУ-201); антидепрессивное (РГПУ-201, РГПУ-197); анксиоседативное действие (РГПУ-195, РГПУ-196 и, в большей степени РГПУ-201); анксиоактивирующее действие (РГПУ197); психостимулирующее действие (РГПУ- 198 и РГПУ-199).
2. Соединения РГПУ-195, РГПУ-197 и РГПУ-201 в тестах УРПИ, ТЭИ, а также в условиях амнезирующего действия скополамина, острого и хронического стресса оказывают выраженное ноотропное действие.
3. Соединения РГПУ-195, РГПУ-197 и РГПУ-201 оказывают антидепрессантное действие в тестах «подвешивания мышей за хвост» и принудительного плавания по Порсолту, более выраженное на низкоактивных животных, и менее – на высокоактивных. Антидепрессантное действие соединения РГПУ-201 проявляется как на низко-, так и на высокоактивных животных. По антидепрессивной активности данное вещество превосходит препарат сравнения мелипрамин.
|
|
4. Соединения РГПУ-195, РГПУ-197 и РГПУ-201 при однократном внутрибрюшинном введении обладают анксиолитической активностью в тесте конфликтной ситуации по Вогелю, но достоверно уступают по активности препарату позитивного контроля диазепаму.
5. Соединения РГПУ-195, РГПУ-197 и РГПУ-201 как при однократном, так и при курсовом профилактическом внутрибрюшинном введении проявляют выраженную нейропротекторную активность в условиях острого эмоционально-болевого и гипергравитационного стресса, депривации парадоксальной фазы сна, острой генерализованной гиперкапнической и гемической гипоксии, генерализованных судорог. Соединение РГПУ-195 проявляет наиболее выраженную нейропротекторную активность и по ряду показателей достоверно превосходит препарат сравнения фенотропил.
6. Гетероциклические производные ГАМК оказывали более выраженное ноотропное, анксиоседативное и антидепрессивное действие, чем производные глутаминовой кислоты, имеющие одинаковые заместители в бета-положении. Производные глутаминовой кислоты оказывали активирующее действие с проявлениями тревоги.