Ход работы: в штативе устанавливают 7 пробирок. В 7-ю наливают 2,4мл физ. р-ра. Во все остальные – по 1мл.
1. В 7-ю пробирку добавляют 0,1мл сыворотки больного – получают разведение сыворотки 1:25.
2. Из 7 пробирки в 1-ю вносят 1,0мл разведенной сыворотки (получают разведение 1:50), перемешивают. Из нее 1,0 мл сыворотки переносят во вторую пробирку (получают разведение 1:100), перемешивают и переносят 1,0 мл сыворотки в 3-ю пробирку…и т.д. до 5-ти. В 6-ю пробирку сыворотку не вносят, так как в ней – контроль антигена.
3. В 1-6 пробирки вносят по 3 капли диагностикума. Штатив помещают в термостат на 2 часа при 37С. Делают предварительный учет, окончательный учет через 18-20 часов, выдерживая при комнатной температуре.
Ингредиенты | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 |
1:50 | 1:100 | 1:200 | 1:400 | 1:800 | КА | КС(1/25) | |
0,9%р-р Nacl сыворотка больного диагностикум (в каплях). | 1,0 1,0 3 | 1,0 1,0 3 | 1,0 1,0 3 | 1,0 1,0 3 | 1,0 1,0 3 | 1,0 1,00 Вылить 3 | 2,4 1,0 3 - |
Результат |
Учет результатов начинают с контролей. Контроль сыворотки должен оставаться прозрачным, контроль антигена – равномерно мутным. Просматривают пробирки в подхлдящем свете с помощью лупы или агглютиноскопа. Агглютинат постепенно оседает на дно в виде «зонтика», а жидкость над осадком просветляется.
|
|
Вывод:
Занятие № 9 Дата_____________________
Тема: Иммунодиагностика инфекционных заболеваний. Серологические реакции II порядка.Современные иммунодиагностические реакции.
Основные вопросы, разбираемые на занятии:
1. Реакции иммунного лизиса. Бактериолиз.
2. Реакция связывания комплемента.
2. Реакции иммунофлюоресценции: сущность, способы постановки.
3. Иммуноферментного анализа: сущность, способы постановки.
4. Радиоиммунологического анализа: сущность, способы постановки.
5. Иммуноблоттинг, механизмы и применение.
Задание №1. Заполните таблицу «Механизмы серологических реакций второго порядка».
НАЗВАНИЕ РЕАКЦИИ | МЕХАНИЗМ РЕАКЦИИ (рисунок-схема и описание) |
Реакция бактериолиза | |
Реакция гемолиза | |
Реакция связывания комплемента, РСК |