Биологические свойства возбудителей бруцеллеза

Бруцеллез хроническое инфекционное заболевание человека, животных с лихорадкой, поражением опорнодвигательного аппарата, нервной, сердечно-сосудистой, половой систем.

У животных поражается половые органы, суставы, бурсы. Клинически у самок мертворожденные, задержание последа, эндометрит, бесплодие, затем поражение суставов, бурс. У самцов поражение суставов и бурс. 

Источник больные, которые выделяют возбудителей с мочой, молоком, фекалием, околоплодными водами, последом, кровью.

Способ заражения: контактный, алиментарный, половой. 

Возбудителей относят к отделу Gracilicutes, роду Brucella. Впервые возбудителя бруцеллеза выделил Брюс в 1886-87 г.г., в честь ученого возбудителей называют бруцеллами. У животных циркулирует 6 видов бруцелл:

▪ Brucella melitensis –циркулирует у овец и коз, имеет 3 биовара, 1 и 3 биовары поражают человека;

▪ Brucella abortus bovis – возбудитель бруцеллеза у крс, известно 9 биоваров к 1, 6, 9 чувствителен человек;

▪ Brucella suis имеет 5 биоваров, циркулирует у свиней, ко всем биоварам чувствителен человек;

▪ Brucella canis – возбудитель бруцеллеза собак;

▪ Brucella ovis – возбудитель инфекционного орхита и эпидидимита баранов, самки не болеют;

▪Brucella neotomae – циркулирует у древесных крыс.

Морфологические свойства. Мелкие грамотрицательные коккоподобные палочки, по Козловскому красятся в красный цвет, аэробы. Brucella abortus bovis микроаэрофил.

Культуральные свойства. Растут медленно 30 дней на элективных средах: 

▪ МППБ, МППА (мясопептоннопеченочный бульон и

агар);

▪ ПГГБ и ППГА (печеночноглюкозный глицериновый бульон и агар).

На жидких средах возбудители образуют помутнение с крошковидным осадком, на плотных – выпуклые, прозрачные колонии.

Биохимические свойства. Слабые, все виды образуют сероводород.

Факторы вирулентности.  

▪ эндотоксин вызывает воспаление в местах скопления, при циркулировании в крови повышение температуры, интоксикацию, ГЗТ;

▪ ферменты проникновения: гиалуронидаза, нейрамидаза, возбудитель проникает через неповрежденную кожу, слизистые;

▪ ферменты патогенности: уреаза, ее накопление формирует сильный токсикоз с поражением сердечнососудистой и нервной системы.

Антигенные свойства. Все виды имеют соматический О-антиген. Два вида соматических антигенов имеют Brucella melitensis, Brucella abortus bovis, Brucella suis и взаимодействуют с S-, R- диагностическими сыворотками. Brucella canis, Brucella ovis постоянно агглютинируют с R- сывороткой.

Устойчивость. В земле 40 дней, в навозе 120 дней, в воде 5 месяцев. В мясе 320 дней, в шкурах 2 месяца, в шерсти 3-4 месяца. Чувствителен к 2%-ному фенолу, 0,5%-ному лизолу, 2%-ному формалину, 1%-номй хлорамину, 1%-ной соляной кислоте, гибель за несколько мин.

Лабораторная диагностика бруцеллеза

Диагностику бруцеллеза проводят согласно Наставления по диагностике бруцеллеза сельскохозяйственных животных от 2003г.

Диагностика заболевания включает: серологические исследования, аллергическое исследование, бактериологическое исследование, молекулярно-генетическое исследование. ● Серологические исследования предусматривают исследование сыворотки крови животных в серологических реакциях:

▪ крс исследуют в РА (диагностический титр 1:200), РБП (розбенгалпробе), РСК, РДСК (положительный титр 1:5, 1:10), РИД с О-полисахаридным антигеном и КР

(кольцевая реакция с молоком);

▪ мелкий рогатый скот исследуют в РА (положительный титр 1:100), РСК, РДСК (положительный титр 1:5, 1:10), РИД с О-полисахаридным антигеном;

▪ свиней исследуют в РСК, РДСК (положительный

титр 1:5, 1:10);

▪ собак исследуют в РА (положительный титр 1:50), РСК (положительный титр 1:5,1:10).

● Кольцевая реакция с молоком с целью определения благополучия ферм по бруцеллезу крс и проверки молока на рынках, когда к 2 мл молока добавляют 0,1 мл антигена, помещают в термостат или водяную баню 37 -38⁰ С на 1 час и 30 мин выдерживают при комнатной температуре, если в слое сливок появляется синее или красно-вишневое кольцо – положительный результат, если равномерное окрашивание – отрицательный.

● Аллергическое исследование проводят у свиней с бруцеллином ВИЭВ, внутрикожной пробой, учет через 24, 48 часов.

● Бактериологическое исследование мертворожденного, лимфоузлов положительно реагирующих в серологических реакциях животных, содержимого бурс включает бактериоскопию по Граму мазков отпечатков, затем посевы. Выделенную чистую культуру, идентифицируют по морфологическим, культуральным, антигенным свойствам, в капельной (пластинчатой) РА с диагностическими S- и R- бруцеллезными сыворотками.

● Биопроба (биологическое исследование) проводят

на морских свинках, используя тот же материал, из которого готовят суспензию 1:10 на физиологическом растворе. Морским свинкам вводят 1 мл суспензии, на 15,25, 40 сутки после заражения берут кровь и сыворотку исследуют в пробирочной РА в разведениях 1:10 до 1:80. Положительно реагирующих умертвляют, из лимфоузлов, селезенки, печени, костного мозга выделяют чистую культуру, идентифицируют. Срок исследования два месяца.

● Молекулярно-генетическое исследование ПЦР суспензии патматериала, содержимого гигром, стабилизированной крови, молока, спермы самцов с признаками орхита и эпидидимита, обнаруживают ДНК бруцелл животных.

Иммунитет. Формируется медленно, сопровождается накоплением Ig М и IgG, неполных антител, сенсибилизацией организма к возбудителю. Накопление антител не имеет существенного значения для освобождения организма от возбудителя. Элиминирование возбудителя обеспечивают Т-клетки.

В зонах пастбищного содержания животных, северных оленей целесообразно использовать вакцины для крс: ▪ живая бруцеллезная вакцина из штамма №19; ▪ живая бруцеллезная вакцина из штамма №82.

У вакцинированных высокие титры антител, но нет мертворожденных и распространения заболевания.

В овцеводстве используют живую вакцину из штамма Rev-1.

Лечение. Бесперспективно, больных выбраковывают. У человека применяют аминогликозиды разных поколений, рифампицин, тетрациклин, а для профилактики вакцину из штамма №19.