Хранение и оттаивание замороженной спермы

При работе со спермой следует помнить, что на жизнеспособность спермиев влияют следующие факторы: - свет -солнечные лучи убивают спермиев. Поэтому со спермой надо работать при рассеянном (неярком) дневном или искусственном свете; температура -нагревание выше 42°Си охлаждение до минус 1°Сопасны для спермиев. Работу со спермой проводить в лаборатории при комнатной температуре; вода -губительно действует на спермиев; спирт -вызывает гибель спермиев, поэтому инструменты и посуду после обеззараживания спиртом следует обмывать стерильным 2,8%-ным раствором лимоннокислого натрия.

Запрещается хранить медикаменты и дезинфицирующие средства, не предусмотренные для использования на пунктах по осеменению животных, курить в помещении, где хранят сперму.

На пункты искусственного осеменения сперму доставляют с племпредприятия и хранят при температуре минус 196°Св соломинках, необлицованных и облицованных гранулах.

При работе со спермой следует соблюдать следующие правила:

-не допускается преждевременное оттаивание повторное замораживание спермы. Кратковременное повышение температуры, например, при перекладывании расфасованной спермы из стационарного хранилища в транспортный сосуд Дьюара или из одного сосуда в другой, оказывает отрицательное воздействие на ее качество;

-до использования сперму необходимо постоянно хранить в жидком азоте;

-перед использованием оператор извлекает дозу спермы (соломинку или гранулу) из сосуда Дьюара и оттаивает, предварительно подготовив все необходимые инструменты и оборудование для этой работы.

Оттаивание спермы в соломинках. Правой рукой поднимают крышку сосуда Дьюара и кладут рядом, а левой мешочек или контейнер со спермодозами или соломинками до нижнего края горловины сосуда. Правой рукой берут два пинцета и концы их охлаждают в жидком азоте до прекращения кипения. Охлажденным пинцетом вынимают одну соломинку, быстро и энергично стря 190

хивают остатки жидкого азота и немедленно переносят в водяную баню для оттаивания. Канистру с оставшимися соломинками опускают на дно сосуда, который сразу же закрывают крышкой.

Оттаивание спермы в соломинках проводят в биотермостате или на водяной бане при 38°Св течение 10 сек. Затем соломинку вынимают, насухо протирают стерильной салфеткой. Одновременно оттаивают не более 2 доз при условии немедленного их использования (в течение 10-15 мин). Размеры водяной бани должны соответствовать размерам соломинок (высота не менее 150 мм, ширина 100-120 мм). Качество спермы определяют по общепринятой методике.

Для проверки качества спермы необходимо использовать подогретые предметные и покровные стекла, находящиеся во время работы на обогревательном столике микроскопа. Каплю спермы помещают на предметное стекло, наносят каплю 2,9%-ного раствора лимоннокислого натрия, смешивают со спермой и накрывают покровным стеклом. Дают ей нагреться до 38°Сна обогревательном столике микроскопа. После чего при увеличении микроскопа в 100-180 раз отыскивают поле зрения с наибольшей подвижностью спермиев.

Подвижность спермиев оценивают по десятибалльной шкале.

Киспользованию допускается сперма быков-производителей, имеющая следующие характеристики:

-подвижность спермиев, не ниже 4 баллов (40%);

-число спермиев с прямолинейно-поступательным движением (ППД) в дозе не менее 20 млн.;

-объем дозы, 0,1-1,0;

-колититр отрицательный: микроорганизмы, вызывающие инфекционные заболевания, не допускаются.

От высокоценных быков-производителей и улучшателей, а также от быков, происходящих от родителей, признанных улучшателями, допускается к использованию сперма с подвижностью не ниже 4 баллов и числом спермиев с прямолинейно-поступательным движением в дозе не менее 20 млн.

Способы осеменения коров и телок

Для осеменения коров и телок сперму вводят в шейку матки. Существует три способа осеменения: ректо-цервикальный, маноцервикальный и визо-цервикальный. Независимо от способа осеменен оператор по искусственному осеменению обязан:

-проводить осеменение коров и телок на пункте искусственного осеменения; 191

-быть в чистом халате, с коротко подстриженными ногтями рук;

-следить, чтобы привод коров и телок на пункт и фиксация их в станке были безболезненными и не вызывали стрессовых реакций;

-обмывать наружные половые органы у животных теплой водой;

-перед осеменением размороженную сперму при температуре +38°Спроверяют на подвижность спермиев.

Цервикальный способ искусственного осеменения коров