Норма тромбинового времени 14-16 секунд

Этапы коагуляционного гемостаза

• Протромбиназообразование

• Тромбинообразование

• Фибринообразование

• Посткоагуляционная модификация фибринового тромба

• Лизис фибринового тромба

Скрининговые тесты для оценки системы гемостаза

АПТВ (АЧТВ) – активированное парциальное тромбопластиновое время. «Частичное» или «парциальное» указывает на то, что в тесте используются реагенты, содержащие фосфолипиды, а не тканевые факторы.

АПТВ используется как скрининговый тест для оценки внутреннего каскада свертывания плазмы.

Набор реактивов для АПТВ содержит:

1. активатор контактной фазы (высокодисперсионная суспензия отрицательно заряженных частиц коалина (белая глина) и фосфолипиды.

2. СаСl₂ добавляют в пробу отдельно как стартовый реактив.

 

Ход определения. Мануальный вариант.

1. К 0,1 мл исследуемой бедной тромбоцитами плазмы добавляют 0,1 мл АПТВ-реагента. Пробирку встряхивают и помещают на 3 мин на водяную баню при +37⁰С.

2. После 3 минут инкубации к смеси добавляют 0,1 мл раствора 0,277% СаСl_2, предварительно подогретого до +37⁰С и включают секундомер.

3. Определяют время свертывания при периодическом (1 раз в 1-2 секунды) покачивании пробирки.

Результат выражают в секундах.

ПТВ - Протромбиновое (тромбопластиновое) время – время свертывания бедной тромбоцитами плазмы при добавлении к ней тканевого тромбопластина.

Ход определения. Мануальный вариант.

1. За 10-20 минут до исследования тромбопластин-кальциевую смесь помещают на водяную баню при температуре +37⁰С.

2.  0,1 мл бедной тромбоцитами плазмы прогревают в пробирке на водяной бане при +37⁰С 1 минуту.

3. добавляют 0,2 мл прогретой тромбопластин-кальциевой смеси

4. Включают секундомер.

5. Определяют время свертывания при периодическом (1 раз в 1-2 секунды) покачивании пробирки.

6. Результат учитывают в секундах и выражают по одному из следующих вариантов:

А. Указывают ПТВ в секундах.

Для мануального исследования норма ПТВ 12-15 секунд.

Б. ПТИ – протромбиновый индекс:

     ПТИ= (ПТВ контрольной нормальной плазмы/ ПТВ пациента)х100%

           Норма ПТИ: 80-120%

В. ПТО - протромбиновое отношение:

ПТО= ПТВ пациента / ПТВ контрольной нормальной плазмы

       Норма ПТО: 0,7-1,1%

Г. МНО – международное нормализованное отношение:

Для учета чувствительности тромбопластина, ПТО возводят в степень МИЧ (указан в маркировке фирмой-производителем) и таким образом рассчитывают МНО.

Например, ПТВ пациента=45”, ПТВ контрольной нормальной плазмы=12,7”.

               МИЧ, указанный в инструкции к тромбопластину=1,1

               МНО для данного пациента= ПО МИЧ=(45:12,7)^1,1=3,54^1,1=3,97

Тромбиновое время

Определяют время свертывания бедной тромбоцитами плазмы под влиянием тромбина. Тромбиновый тест характеризует течение конечного этапа свертывания крови – скорость превращения фибриногена в фибрин и зависит от содержания фибриногена и ингибиторов, блокирующих действие тромбина, а также «сборку» фибрин-мономера.

Ход определения. Мануальный вариант.

1. 0,2 мл бедной тромбоцитами плазмы прогревают в пробирке на водяной бане при +37⁰С 1 минуту.

2. Добавляют 0,2 мл раствора тромбина (до исследования р-р тромбина должен иметь температуру +18-+25⁰С).

3. Включают секундомер.

4. Определяют время свертывания при периодическом (1 раз в 1-2 секунды) покачивании пробирки.

5. Результат выражают секундах.

Норма тромбинового времени 14-16 секунд

Фибриноген (гравиметрический метод по Р.А.Рутберг)

Принцип метода. Образовавшийся после свертывания плазмы фибрин высушивают и по весу сгустка определяют содержание фибриногена в плазме.

Ход определения.

1. К 1,0 мл плазмы бедной тромбоцитами добавляют 0,1 мл раствора тромбина.

2. Смесь инкубируют на водяной бане при +37⁰С 10 минут.

3. Образовавшийся сгусток переносят на фильтровальную бумагу, высушивают путем сжатия и перемещения сгустка по фильтру.

4. Такое высушивание продолжают до тех пор, пока на фильтре не перестанут определяться следы влаги.

5. Сгусток фибрина выдерживают на открытом воздухе при комнатной температуре и взвешивают на торзионных весах.

6. При умножении массы фибрина на коэффициент 0,2 рассчитывают содержание фибриногена.

7. Норма фибриногена 2-4 г/л